Рыба аргентина полезные свойства: Рыба аргентина полезные свойства и противопоказания


Содержание

Рыба аргентина содержание полезных веществ, польза и вред, свойства

Свойства Рыбы аргентина

Пищевая ценность | Витамины | Минеральные вещества

Сколько стоит Рыба аргентина ( средняя цена за 1 кг.)?

Москва и Московская обл.

125 р.

 

Как биологический вид рыбу аргентину относят к семейству серебрянковых отряда сельдеобразных. По внешнему виду ее можно узнать за счет тонкого, вытянутого тела, сжатого с боков и суженого к хвосту. Несмотря на маленькую голову, у рыбы аргентины довольно большие глаза и слегка заостренный нос. Спина рыбы имеет желтую или зеленовато-серую окраску. Отличительной особенностью рыбы аргентины служит серебряная лента с голубоватым блеском вдоль боков. Она относится к стайным придонным рыбам и обитает в северных водах стран Европы на глубине до 550 метров.

Рыба аргентина — один из важнейших объектов вылова в Исландии, Норвегии, Дании, Ирландии и на Фарерских островах. Что касается нашей страны, то в российских водах ее можно встретить в южной части Баренцева моря.

Питательные свойства рыбы аргентины несомненно обусловлены ее рационом, который довольно разнообразен и включает в себя креветок, криль, различные виды беспозвоночных, гребневиков, кальмаров, а иногда и мелкую рыбку. Этот вид рыбы богат витаминами (PP и B2), а также макро и микроэлементами, которые жизненно важны для здоровья человека.

Среди любителей морепродуктов лучшим способом приготовления рыбы аргентины считается жарка, хотя довольно часто из нее готовят вкуснейшее заливное. Жареной аргентиной можно наслаждаться как в горячем, так и холодном виде, но поскольку остывшая рыба быстро высыхает, ее советуют замариновать. Относясь к столовым сортам рыбы, белое мясо рыбы аргентины, которое содержит низкое количество жира и одновременно высокое – белка, во вкусовом отношении характеризуется как премиальное.

Довольно интересно, что мясо рыбы аргентины, как и корюшки, имеет запах свежих огурцов.

Для раскрытия отменных вкусовых свойств рыбы аргентины одним из многочисленных вариантов кулинарной обработки является тушение с овощами. Знатоки и любители белой рыбы по достоинству оценят аргентину в отваренном виде с укропом под белым соусом. В данном случае гастрономические свойства рыбы аргентины проявятся в нежном, сочном вкусе и тонком аромате.

Пищевая ценность

  • Москва и Московская обл. 125 р.

Витамины

Макроэлементы

Микроэлементы

Креветочная рыба или конгрио | ДЕФА

Креветочная рыба или конгрио

Креветочная рыба или конгрио (лат. Genypterus blacodes) — крупная рыба семейства ошибневых (Ophidiidae). В Новой Зеландии часто рыбаками зовётся морским угрём, в русском языке из-за розового оттенка мяса и вкуса, схожего с креветкой, её называют креветочной рыбой; промысловое название — «кинг клип».

Имеет длинное круглое тело с хвостом, как у угря. Обычный размер особи – 0,45 – 1 м.; масса – 0,55 – 4,6 кг. Мелкие кости практически отсутствуют.

У рыбы гладкая пёстро-розовая кожа с небольшими пестрыми пятнами, которая бледнеет на животе. Она покрыта толстым слоем слизи, которая помогает ей протискиваться между камней на дне, где она кормится.

Размерный ряд гр./шт.: 250-500; 500-700; 500-1000; 1000-2000; 1500-2000; 2000-3000.

Тип заморозки: береговая, морская.

Блочная: Корея, Аргентина, Уругвай, Новая Зеландия.

IQF: Китай

Сезонность вылова: круглый год, в виде прилова при ловле хека.

Экспортеры из Кореи, Аргентины, Уругвая, Новой Зеландии поставляют рыбу небольших размеров. Для рыб крупных размеров могут использовать индивидуальную упаковку (IWP). Рыба, экспортируемая из Китая, идет с глазировкой.

Способ разделки: тушка (потрошеная).

Страны-поставщики: Корея; Аргентина; Уругвай; Новая Зеландия; Китай.

Конгрио: полезные свойства

Мясо кинг клипа содержит уникальный комплекс полезных веществ, витаминов, а также аминокислоты, жирные кислоты Омега-3, которые не вырабатываются организмом самостоятельно. Из витаминов больше всего – Витамина А, Витамина D, Витамина В12.

Из минералов больше всего – цинка, магния, фосфора, калия. Конгрио снижает возможность образования сахарного диабета, а также улучшает работу головного мозга, уменьшает риск развития болезни Альцгеймера и инсульта.

Купить рыбу и морепродукты:

состав, разновидности и полезные свойства рыбы Аргентина

Рыба аргентина (лат. argentina) — это название морской рыбы из семейства серебрянковых, отряда лососеобразных, обитающей на севере Европы. Рыба довольна узнаваема за счёт своей продолговатой вытянутой формы, больших глаз и заострённого носа, поднятого вверх. Окраска на спине имеет замысловатые серебристо или золотистозеленоватые оттенки.

Отличительным признаком рыбы аргентины служит тонкая тёмно-серебристая полоса вдоль боков.

Аргентина — важная промысловая рыба. Её добыча осуществляется на глубине около ста метров, где рыба ведёт активный стайный образ жизни, питаясь преимущественно мелкими рачками, червями и более мелкими рыбёшками.

Виды

Существует около 5 различных видов рыб вида аргентина. Наибольшую известность заслужила аргентина североатлантическая, известная под названиями «серебрянка» или «золотая корюшка».

Это интересно! Аргентине посвящают стихи и песни. К примеру, Валерий Гордин написал такие строки об этой рыбе:

Мне вчера рыбаки рассказали,
Как их корюшка тянет к себе:
Восемь раз уже с льдины снимали,
Но рыбачат, доверясь судьбе.

Состав

Как и другие обитатели моря, аргентина имеет в своём составе целый комплекс легкоусвояемых аминокислот, витамины Е, группы B, минералы — йод, селен, фтор, хром, фосфор, калий и сера.

Польза

  1. Наличие большого количества аминокислот полезно для состояния сердечно-сосудистой системы, при заболевании суставов и для общего самочувствия у пожилых людей.
  2. В состав корюшки входит 17,6 гр. белка на 100 гр. продукта и всего 88 ккал. Это делает мясо рыбы неоценимым помощником в борьбе за стройность и хорошую фигуру. Аргентина подходит для сторонников правильного питания, имея сбалансированный состав при небольшой энергетической ценности.
  3. Чешую аргентины используют в промышленных целях, добывая из неё специальную перламутровую эссенцию, используемую для покрытия искусственного жемчуга и для добавления в состав лаков для ногтей.
  4. Рекомендуют включать в рацион мясо аргентины и тем, кто жалуется на тусклый цвет лица и ломкость волос. Входящая в состав рыбы сера — это настоящий элемент красоты, способный придать блеск волосам и свежесть лицу.

Как приготовить и подавать

Готовят серебрянку разными способами, получая сочное и нежное мясо. Идеальный способ приготовления этой рыбы — быстрая жарка в кляре. Кроме этого, рыбу тушат с овощами, запекают в духовом шкафу, жарят на пару, делают из неё консервы, подвергают копчению.

Подают аргентину с масляными соусами и лёгким гарниром: картофельным пюре на молоке, рисом с овощами, тушёной капустой, печёнными грибами в сливках.

Как выбирать

Золотая корюшка обитает в морских глубинах, а значит в её составе нет промышленных антибиотиков или красителей. Поэтому, выбирая эту рыбу, обращайте внимание на:

  • правильный цвет мяса — белый;
  • размер рыбы может достигать 3х кг;
  • чешуя у аргентины должна быть ровная, без трещин.

Хранение

В замороженном виде рыба хранится до полугода. В свежем виде приготовить рыбу следует в течении дня.

Рыба аргентина. Свойства рыбы агрентины

Как биологический вид рыбу аргентину относят к семейству серебрянковых отряда сельдеобразных. По внешнему виду ее можно узнать за счет тонкого, вытянутого тела, сжатого с боков и суженого к хвосту. Несмотря на маленькую голову, у рыбы аргентины довольно большие глаза и слегка заостренный нос. Спина рыбы имеет желтую или зеленовато-серую окраску. Отличительной особенностью рыбы аргентины служит серебряная лента с голубоватым блеском вдоль боков. Она относится к стайным придонным рыбам и обитает в северных водах стран Европы на глубине до 550 метров. Рыба аргентина — один из важнейших объектов вылова в Исландии, Норвегии, Дании, Ирландии и на Фарерских островах. Что касается нашей страны, то в российских водах ее можно встретить в южной части Баренцева моря.

Питательные свойства рыбы аргентины несомненно обусловлены ее рационом, который довольно разнообразен и включает в себя креветок, криль, различные виды беспозвоночных, гребневиков, кальмаров, а иногда и мелкую рыбку. Этот вид рыбы богат витаминами (PP и B2), а также макро и микроэлементами, которые жизненно важны для здоровья человека.

Среди любителей морепродуктов лучшим способом приготовления рыбы аргентины считается жарка, хотя довольно часто из нее готовят вкуснейшее заливное. Жареной аргентиной можно наслаждаться как в горячем, так и холодном виде, но поскольку остывшая рыба быстро высыхает, ее советуют замариновать. Относясь к столовым сортам рыбы, белое мясо рыбы аргентины, которое содержит низкое количество жира и одновременно высокое – белка, во вкусовом отношении характеризуется как премиальное. Довольно интересно, что мясо рыбы аргентины, как и корюшки, имеет запах свежих огурцов.

Для раскрытия отменных вкусовых свойств рыбы аргентины одним из многочисленных вариантов кулинарной обработки является тушение с овощами. Знатоки и любители белой рыбы по достоинству оценят аргентину в отваренном виде с укропом под белым соусом. В данном случае гастрономические свойства рыбы аргентины проявятся в нежном, сочном вкусе и тонком аромате.

Что такое аргентина в еде. Аргентинская кухня. Блюда и рецепты Аргентинской кухни. Цены на еду в Аргентине

Аргентинская кухня Блюда аргентинской кухни отличаются ярким колоритом и объединяют традиции нескольких культур. Две европейских привнесли переселенцы из Испании и Италии. Рабы из Африки принесли элементы своей кухни. Добавим креольские традиции, осевшие на древнюю индейскую культуру, и получим уникальный симбиоз, которые называется аргентинская кухня.

Одновременно на приготовление национальных блюд оказывали влияние кулинарные культуры соседних стран: Мексики, Перу, Бразилии, Чили. Особенно эти тенденции заметны в приграничных регионах, но они не изменяют общее представление о национальных гастрономических традициях.

Простая и сытная аргентинская кухня покоряет всех, кто знакомится с ней в первый раз. Хорошо знакомый набор продуктов: мясо, рыба, яйца, овощи, бобовые и крупяные культуры. Их жарят, тушат, варят, запекают, обязательно приправляют острыми соусами с ароматными приправами.

Региональная кухня Аргентины

Обширная территория страны, различные географические условия определили особенности региональной кухни Аргентины. В северо-западных областях страны преобладает аборигенная культура индейцев. В кухне этого региона преобладает растительная пища. Популярностью пользуются блюда из маиса, картофеля, фасоли, авокадо, тыквы. Обязательно входят в рацион молочные продукты, в частности сыры. Мясные блюда в регионе готовят из баранины, свинины, козлятины. Также используют мясо лам.

В северо-восточных районах, где протекают две пресноводные реки, распространены блюда из рыбы, которые гармонично сочетаются с вареным рисом. Дополняют рацион овощи, яйца, молоко и мясо — продукты, традиционно используемые в пищу местными индейцами. Современная кухня этих районов Аргентины сохранила древние традиции. Здесь по-прежнему готовят асадо — мясо (в том числе и экзотических животных, например, кайманов), которое запекают на камнях.

В южных регионах сильны местные традиции, что отражается в местной кухне. Блюда из мяса броненосцев, страусов нанду пользуются здесь повышенным спросом. Их часто предлагают отведать туристам. Близость атлантического побережья позволила включать в местное меню большое количество океанской рыбы и морепродуктов. Еще одна особенность региональной кухни — влияние итальянской культуры. Иммигранты с Апеннинского полуострова привезли с собой много блюд, которые успешно ассимилировали на аргентинской земле.

Современная аргентинская кухня рецепты предлагает разнообразные. Особенно это заметно в центре страны, где перемешаны все культуры, а соответственно и кухни, народов, для которых Аргентина стала второй родиной. Здесь готовят пончики, тортилью, разновидность испанского хамона. Кухня этого региона представлена большим количеством десертов, многие из которых похожи на европейские. Отличает их наличие местных экзотических фруктов.

Аргентинская кухня — это просто

При всем разнообразии и необычности блюда аргентинской кухни приготовить не сложно. Наши рекомендации помогут правильно выбрать продукты или адаптировать понравившееся блюдо под отечественную кухню. Также мы поможем разнообразить домашнее меню оригинальными рецептами, которые можно использовать как повседневные или сделать украшением праздничного стола.

Кто бы мог подумать, что на родине танго живут не только потрясающие танцоры, но также кулинары с большой буквы. Своим гостям они предлагают десятки национальных блюд, в основе которых лежат рецепты, собранные с разных иностранных государств, и доработанные на свой манер. Их здесь копили годами под влиянием кулинарных пристрастий переселенцев из Европы и не только. В итоге, пробуя сегодня очередной аргентинский деликатес, заказанный в одном из многочисленных местных ресторанчиков, можно невольно ощутить в нем вкус Италии, Индии, Африки, Испании, Южной Америки и даже России.

История

История аргентинской кухни тесно связана с историей самой страны. Этим, кстати, и объясняется одна из ее особенностей – региональность. Дело в том, что разные части государства, которые в разное время были заполнены выходцами из других народов, обрели самобытные и существенно отличающиеся друг от друга кулинарные особенности, а также наборы популярных блюд. Так, северо-восток страны, кухня которого формировалась благодаря стараниям индейцев гуарани, сохранил массу рецептов блюд из рыбы (ею богаты местные реки) и риса. Кроме того, как и прежде, в почете здесь чай мате.

В свою очередь, кухня центральной части, претерпевшая изменения, внесенные иммигрантами из Италии и Испании, со временем потеряла пищевые вкусы пастухов гаучо, приобретя взамен истинные европейские традиции. Интересно, что свою лепту в историю ее развития внесли и русские, подарив местным бефстроганов и оливье. Последний здесь назвали просто: «Русский салат».

Что касается северо-запада, там все осталось по-прежнему. Просто потому, что выходцами из других стран этот регион практически не населялся, благодаря чему и смог сохранить черты «доиспанского» периода. Как и много лет назад здесь преобладают блюда из картофеля, маиса, ятоба, перца, киноа, томатов, фасоли, плодов рожкового дерева, амаранта.

Особенности
  • Огромное количество овощей, присутствующих на столах аргентинцев круглый год, самостоятельно или в составе сложных блюд. Объясняется все сельскохозяйственной специализацией страны. До прихода испанцев здесь выращивали картофель, томаты , тыкву, бобовые, кукурузу. Позже к ним добавилась пшеница .
  • Любовь к говядине и телятине . Исторически сложилось так, что этот вид мяса стал визитной карточкой страны. Об этом свидетельствуют не только туристы, но также статистические данные: Аргентина занимает второе место по поеданию говядины в мире. Намного реже здесь едят свинину, оленину, баранину, мясо страуса. До ХІХ века говядину преимущественно жарили на костре либо горячих камнях, позже стали коптить, запекать, отваривать с овощами.
  • Обилие рыбы и морепродуктов в меню, которое обусловлено географическими особенностями.
  • Отсутствие специй и пряностей в блюдах. Местные жители буквально ломают стереотипы относительно того, что южные страны не могут жить без острой пищи. Сами аргентинцы объясняют это тем, что приправы лишь портят вкус. Единственное, что здесь могут добавить в блюдо – это перец.
  • Развитие виноделия. Красные аргентинские вина, которые производятся в таких провинциях как Мендоза, Сальто, Патагония, Сан-Хуан, пользуются огромной популярностью далеко за пределами страны, впрочем, как и местные джин и виски.

К тому же, Аргентина – этой рай для вегетарианцев и сыроедов. Ведь на ее территории ярым противникам мяса могут предложить всевозможные овощные блюда и блюда из фруктов, знакомых или экзотических, таких как кажжито, лима.

Основные способы готовки:

Тем не менее, как бы там ни было, лучше всего описывают местную кухню ее национальные блюда. В их число вошли:

Пирожки Эмпанадас – выпечка со всевозможными начинками, включая даже анчоусы и каперсы . По своему внешнему виду напоминают чебуреки.

Пинчос – местный шашлык.

Чураско – блюдо, представляющее собой кубики мяса, поджаренные на углях.

Карне асада – жаркое с бараньими потрошками. Готовится на углях.

Фруктовый хлеб – выпечка с кусочками фруктов.

Пучеро – блюдо из мяса и овощей под соусом.

Парилла – ассорти из стейка, сосисок и потрошков.

Сальса – соус из сливочного масла с перцем чили и бальзамическим уксусом, который подают к рыбным и мясным блюдам.

Дульсе де лече – молочная карамель.

Хеладо – местное мороженое.

Масаморра – лакомство из сладкой кукурузы , воды и молока.

Чай мате – национальный напиток с большим количеством кофеина .

Полезные свойства аргентинской кухни

Неподдельная любовь к нежирному мясу, рыбе и овощам сделала аргентинцев здоровыми, а их местную кухню невероятно полезной. С течением времени последняя лишь совершенствовалась, вбирая в себя лучшее, что можно взять от известных европейских кухонь. Примечательно, что сегодня средняя продолжительность жизни аргентинцев составляет практически 71 год. Согласно статистическим данным за последние несколько десятилетий она постоянно растет.

Традиционная аргентинская кухня — смесь национальных традиций коренных индейских народов и всех тех иностранных рецептов, которые были привезены сюда переселенцами из Европы. Среди блюд Аргентины популярно различное мясо и производные от него.

Самых популярных блюда национальной аргентинской кухни

Еmpanadas — жареные пирожки со всевозможными начинками из рубленого мяса, ветчины и сыра, картошки. Недорогие, питательные и очень вкусные пирожки считаются истинным народным блюдом Аргентины. Только едят их аргентинцы с вином, а никак не с чаем, как это принято у нас.

Сordero al palo — главное мясное блюдо в Патагонии, жареный на вертеле барашек. Это визитная карточка патагонской кухни, отведать которую мы всячески рекомендуем.

Крабы centolla готовятся по-разному, но в Патагонии они считаются одним из самых популярных продуктов. Впрочем, в этих краях любят и другие морепродукты.

Пицца — само собой, привезена из Италии, но говорят, что в Аргентине она особенно вкусна, и уже трудно понять, а не местная ли это национальная кухня.

Мясо страусов нанду — этих птиц разводят на многочисленных фермах, и страусятиной в Аргентине никого не удивишь.

Dulce de leche — многочисленные варианты десертов со сгущенкой. Как правило, это круасаны медиалунас, блинчики, тирамису.

Мороженое — рецепты местных вариантов были привезены европейскими эмигрантами, но тут для них придумывают всяческие подливы, добавки и оттенки вкуса. Обязательно попробуйте.

Масаморра — сельский десерт на основе маиса, воды, сахара и ванили, также популярен вариант с молоком.

Среди типичных напитков Аргентины лучшим считается мате . Заваривание и распитие мате сродни настоящей церемонии — горьковатый, но очень полезный тонизирующий напиток из высушенных измельченных листьев и молодых побегов падуба заваривается в тыквенном калебасе. Пьется в любое время дня и ночи. Распитие мате давно превратилось в Аргентине в ритуал и способ общения. Родиной мате считается Парагвай, но в Аргентине он прижился сразу и бесповоротно.

Еще тут любят вино. Аргентинское вино Мальбек делается в Мендосе. Самым известным среди белых вин считается ароматное Торронтес, которое делают в провинциях Ла-Риоха и Сальта.

Обитатель Атлантического, Индийского и Тихого океанов, рыба аргентина встречается еще в Баренцевом море, богатые уловы собирают в Норвегии, Дании и Ирландии. В продаже можно найти только замороженную, но вкус неплохо сохраняет, как и полезные вещества. Опытные хозяйки предпочитают использовать для жарки или тушения с овощами.

Что за рыба аргентина?


Некоторые хозяйки сомневаются: рыба аргентина – что это за продукт, получится ли вкусное блюдо? Ее также именуют серебрянкой за яркий серебристый окрас, а еще золотой корюшкой, поскольку тушки по бокам сохраняют золотистый отлив и имеют запах, как у корюшек – свежих огурцов. Некоторым любителям морепродуктов он нравится, но и избавиться можно с помощью лимона.

Серебрянка ценится кулинарами за приятный и нежный вкус. Содержит много полезных веществ:

  • белок;
  • жиры;
  • рибофлавин;
  • токоферол;
  • минералы.

Рыба аргентина – как приготовить?

Этот вид можно жарить, тушить с овощами, запекать, рыба аргентина способы приготовления исчисляются десятками. Характерный запах огурцов сохраняет только свежая рыба, его легко убрать не только лимонным соком, но и уксусом. Некоторые хозяйки считают мясо серебрянки суховатым и вымачивают в маринаде.

Особых хитростей, как готовить рыбу аргентину, нет, главное – хорошенько вычистить черную слизь с брюшной части, снять чешую, убрать внутренности. Несколько советов:

  1. При обжаривании золотистый оттенок придадут панировочные сухари.
  2. Запанировать в муке будет проще, если пересыпать ее в пакет, а затем туда же заложить кусочки филе и потрясти.
  3. К рыбе используют душистый перец, горчицу, имбирь, мускатный орех, лимон.

Рыба аргентина запеченная в духовке


Ценители рыбных блюд предпочитают отварную серебрянку, с зеленью и белым соусом. Кому больше по вкусу еду с остринкой, нравится рецепт по-мексикански, с запеканием. Как приготовить рыбу аргентину в духовке, разобраться легко: побольше пряных трав и перца, хотя количество чили лучше регулировать на свой вкус.

Ингредиенты :

  • рыба – 500 г;
  • перец чили – 1 шт.;
  • орегано сухой – 1 ч. ложка;
  • базилик сухой – 1 ч. ложка;
  • лайм – 1 шт.;
  • чеснок – 2 зубчика;
  • перец черный молотый – 1 ч. ложка;
  • томатная паста – 130 мл;
  • масло оливковое – 50 мл.

Приготовление

  1. Рыбу обработать, посыпать солью и специями.
  2. Сделать надрезы.
  3. Полить половиной лайма.
  4. Оставить на 15 мин.
  5. Чеснок порубить, обжарить с орегано.
  6. Добавить томатную пасту, перец чили, базилик.
  7. Выжать вторую половину лайма.
  8. Готовить 5-7 мин.
  9. Форму застелить фольгой, положить рыбу.
  10. Полить соусом, тушить в духовке 40 мин.

Рыба аргентина в кляре


Все виды морской рыбы хороши в кляре, поскольку костей содержат немного. Если смотреть рецепты аргентины рыбы, жареная будет в начале списка. Чтобы получилась красивая, хрустящая корочка, обжаривают при открытой крышке, если же хочется более сочное филе, тогда крышкой сковородку нужно накрыть.

Ингредиенты :

  • рыба – 2 шт.;
  • корень имбиря – 3 см;
  • чеснок – 2 зубчика;
  • мука – 100 г;
  • лимонный сок – 2 ч. ложки;
  • масло растительное – 75 мл;
  • яйца – 1 шт.;
  • перец черный – по вкусу.

Приготовление

  1. Рыбу порубить на порции.
  2. Посолить, поперчить, полить соком лимона.
  3. Натереть корень имбиря, потолочь чеснок.
  4. Смешать с рыбой, оставить на полчаса.
  5. Взбить яйцо, обмакнуть кусочки в смесь, в муку, и опять в яйцо.
  6. Обжарить до корочки.

Рыба аргентина тушеная


Легкий диетический, и при этом сытный ужин – рыба аргентина тушеная с овощами. Великолепно сочетается этот вид с картошкой, помидорами, морковью, цуккини. Из зелени кладут укроп, петрушку, щавель, из специй – горчицу, перец, орегано. Для пикантности можно попробовать добавить кусочки ананасов.

Ингредиенты :

  • рыба – 1 шт.;
  • морковь – 1 шт. ;
  • цуккини – 1 шт.;
  • лук – 1 шт.;
  • помидоры – 2 шт.;
  • томатная паста – 1 ст. ложка;
  • вода – 1 ст.;
  • перец черный – 1 ч. ложка;
  • чеснок – 2 зубчика.

Приготовление

  1. Рыбу обработать, порезать на куски.
  2. Измельчить лук и морковь, обжарить.
  3. Поделить на колечки цуккини и помидоры.
  4. Протушить овощи 5-7 мин.
  5. Поверх выложить рыбу, посыпать тертым чесноком.
  6. Томатную пасту развести водой, залить, закипятить.
  7. Готовится рыба аргентина 15 мин.

Рыба аргентина на пару


Диетический вариант, который сохраняет мягкий и нежный вкус – рыба аргентина, рецепт на пару. Чтобы блюдо получилось ароматнее, в воду или рядом на решетку кладут пряные травы, лавровый лист, специи. Солят незадолго до готовности, чтобы мякоть не теряла сочность. Если время позволяет, лучше кусочки замариновать.

Ингредиенты :

  • рыба – 1 шт.;
  • морковь – 1 шт. ;
  • лук – 1 шт.;
  • сыр твердый – 50 г;
  • укроп – 1 пучок;
  • масло растительное – 50 мл;
  • перец черный – 1 ч. ложка.

Приготовление

  1. Тушку порубить, смешать со специями.
  2. Измельчить морковь, лук, зелень.
  3. Корзинку пароварки застелить фольгой.
  4. Выложить слоями рыбу, овощи, тертый сыр.
  5. Включить программу на 25 мин.
  6. Подержать на подогреве еще 15 мин.

Рыба аргентина на мангале


Самая вкусная рыба аргентина — на углях, морская рыба на мангале всегда поражает букетом ароматов. Мариновать не обязательно, можно очищенные рыбины посолить, поперчить внутри и снаружи, добавить пряные травы. Лучше брать небольшие тушки, чтобы пропеклись качественно. Можно нанизать на прутики и готовить, как шашлык.

Ингредиенты :

  • рыба – 2 шт.;
  • лимонный сок – 5 ст. ложек;
  • соль морская – 1 ч. ложка;
  • перец белый молотый – 0,25 ч. ложки;
  • масло оливковое – 1 ст. ложка;
  • зелень – 1 пучок.

Приготовление

  1. Тушку обработать, промыть, просушить салфетками.
  2. Натереть солью и перцем, сбрызнуть соком лимона.
  3. Подержать 15 мин.
  4. Смазать маслом, выложить на решетку.
  5. Жарить 3-5 мин. с каждой стороны, до корочки.
  6. Рыба запеченная аргентина подается с зеленью.

Рыба аргентина горячего копчения


Если имеется своя коптильня, грех не воспользоваться случаем и не приготовить популярную закуску под пиво. Описывая, как коптить морскую рыбу аргентину, заметим, что можно выбрать горячий или холодный способ, первый – надежнее. Опилки рекомендуется брать от яблони, вишни или акации, допустимо их смешать в равных пропорциях. Коптить надо не меньше часа, затем дать рыбе остыть и проветриться.

Ингредиенты :

  • рыба – 2 кг;
  • соль – 200 г.

Приготовление

  1. Тушку обработать, посыпать солью.
  2. Оставить на час.
  3. Промыть, дать стечь.
  4. Решетку застелить фольгой, разложить рыбины.
  5. Включить коптильню на час.
  6. Готовую серебрянку вывесить на проветривание.

Рыба аргентина на гриле


Хороша рыба аргентина жареная и на гриле, при такой обработке больше сохраняет характерный вкус и полезные вещества, а еще обогащается ароматом трав, специй, который смешивается с дымком, что и придает особый смак угощению. Такое блюдо намного полезнее, чем прожаренное в масле, но важно не передержать тушки на углях, их готовят до золотистой корочки. Лимон можно закладывать в брюшко половинками или дольками.

Ингредиенты .

Аргентинская кухня — воплощение эклектики. Кулинарные традиции Аргентины — это в высшей степени пестрое смешение местных обычаев и огромного количества иностранных рецептов, которые завезли в регион европейские переселенцы. При этом именно в Аргентине влияние европейских тенденций в кулинарии наиболее ощутимо по сравнению с соседними странами.

В то же время, как отмечают эксперты, объединив в себе кулинарные пристрастия европейцев, кухня Аргентины практически полностью утратила свой национальный колорит — традиции индейцев, которые проживали на этой территории до прибытия завоевателей из Испании. На сегодняшний день блюда, которые считаются в Аргентине национальными, похожи по своей рецептуре и способу приготовления на блюда, привычные для жителей стран Средиземноморья (Италии, Испании и Франции).

Кроме того, огромное влияние на аргентинскую кухню оказал тот факт, что сельское хозяйство в стране является очень развитым. Аргентина является одним из мировых лидеров по производству и . Поэтому мясные блюда и выпечка присутствуют в меню аргентинцев в огромном количестве.

Общая характеристика

Взаимосвязь между традициями аргентинской кухни и историей страны невозможно отрицать. Именно особенностями исторического развития Аргентины объясняется региональность местных кулинарных традиций.

На основании гастрономических предпочтений эксперты условно делят территорию Аргентины на четыре части.

Так, в северо-западном регионе сохранились традиции, существовавшие до появления испанских конкистадоров. Европейское влияние здесь минимально, а поэтому в рационе местных жителей огромную роль играют маис, бобы ятобы и плоды рожкового дерева. Кроме того, здесь готовят блюда из , и . Из видов мяса наибольшее распространение здесь получила говядина, также используется мясо ламы, и козлятина. Из мяса готовят подобие жаркого с овощами — пучеро, пирожки-эмпанады, жарят на гриле. Также популярны здесь кукурузные пироги, известные как тамаль.

Кулинарные пристрастия жителей северо-восточного региона сформировались под влиянием традиций индейцев гуарани. Главными блюдами в рационе местного населения являются , речная рыба, корнеплоды маниоки. В этом регионе также пекут пирожки-эмпанады, используя в качестве начинки рис. Мясные блюда готовят из говядины, а также запекают мясо капибар и кайманов. Жажду утоляют мате. Популярны также фруктовые напитки, в которые добавляют .

В центральном регионе страны влияние европейских традиций особенно ощутимо. На сегодняшний день испанская и итальянская кухни практически полностью вытеснили блюда, которые некогда были популярны у местного населения. Именно в центральных районах Аргентины употребляют больше всего мяса. Особой популярностью пользуется говядина, из которой готовят отбивные по-милански, бефстроганов или жарят на углях. Кроме того, итальянская кухня «подарила» жителям центральной Аргентины пиццу и макароны, которые принято заправлять сыром и томатным соусом, а также поленту — итальянский аналог мамалыги.

В регионе также популярны блюда испанской кухни. Преимущественно речь идет о мясных блюдах ( , тефтели), выпечке (тортилья и пончики), а также сладостях, в том числе и очень популярном в Аргентине дульсе де лече — вареном . Французская кухня подарила центральной Аргентине омлет и целый ряд холодных закусок, а из русских блюд невероятной популярностью здесь пользуется салат оливье. Также популярны здесь европейские десерты: кексы, круассаны, пончики по-берлински, торт Шварцвальд, яблочный штрудель, пудинги и т. д.

В южных регионах страны, находящихся на атлантическом побережье, любовью пользуются блюда из океанической рыбы, из которой готовят паштеты и жарят ее на углях. Из мяса здесь популярны свинина, и козлятина. Помимо итальянской и испанской кухни, на кулинарные пристрастия жителей юга Аргентины повлияли кухни стран Скандинавии и Великобритании.

Характерные особенности

Анализируя характерные особенности аргентинской кухни, следует отдельно выделить наиболее значимые ее характеристики.

  1. Овощи присутствуют здесь на столах круглый год в огромном количестве — как в «натуральном» виде, так и в составе сложных блюд. Наиболее популярны томаты, картофель, тыква и .
  2. Говядина и — одна из визитных карточек страны. До девятнадцатого века говядину обычно жарили на горячих камнях, а позже начали запекать, коптить и тушить с овощами.
  3. В аргентинских блюдах практически полностью отсутствуют пряности. По мнению местных кулинаров, они способны только испортить вкус блюда. Единственная приправа, для которой здесь соизволили сделать исключение — это перец.
  4. Аргентина — настоящий рай для вегетарианцев, поскольку те, кто отказывается от употребления мяса, смогут найти в меню местных ресторанов огромное количество блюд из овощей и фруктов.

Основные блюда

Как уже отмечалось выше, аргентинская кухня отличается региональной структурированностью, но есть блюда, которые традиционно присутствуют в рационе местных жителей по всей территории страны.

Овощные блюда

Овощи чаще всего используются в качестве гарнира, а также могут выступать в качестве одного из компонентов сложных блюд. Популярны салаты, хотя они существенно отличаются от привычных европейцам. В Аргентине салат — это не просто измельченные овощи, залитые соусом. Здесь салаты чаще всего очень сложные, с добавлением большого количества ингредиентов животного происхождения, например, яиц, рыбы, морепродуктов, мяса или колбасы.

По всей Аргентине пользуется неизменной популярностью рагу из овощей под названием сальтадо, а также жареный картофель. Любят здесь также холодный томатный суп гаспачо.

Мясные блюда

Среди мясных блюд пальма первенства принадлежит паррильядо — ассорти из большого количества видов мяса, запеченного на гриле. Также популярна говядина во всех видах: жареная, приготовленная на гриле, запеченная.

Примечательно, что такого понятия как «замороженное мясо» в Аргентине просто нет. Считается, что подвергаясь воздействию низких температур, мясо теряет вкус. Поэтому местные жители живут по принципу «купил и приготовил» — иначе говоря, стараются готовить мясо сразу же после визита в магазин.

Одна из визитных карточек Аргентины — асадо, мясо, приготовленное на гриле. Примечательно, что жарится говядина огромными кусками, а потому процесс занимает довольно много времени. Вместе с частями туши жарят также потроха и колбаски из свинины.

Популярен также мясной рулет метамбре. В очень тонкий и широкий кусок мяса, словно в тесто, заворачивают начинку, состоящую из сыра , перца и вареных яиц. Мясо сворачивают в рулет, закрепляют и жарят на углях.

Существуют в Аргентине и более экзотические мясные блюда, например, жареные бычьи хвосты или тушеное филе броненосца.

Рыбные блюда и морепродукты

Рыба в меню местных жителей присутствует в маринованном и вяленом виде, также ее жарят, варят и коптят. Популярны в Аргентине пирожки с рыбой, а также рыба, фаршированная овощами или крабовым мясом. Из морепродуктов в рационе аргентинцев присутствуют , и копченый угорь.

Десерты и напитки

Типичные для аргентинской кухни десерты напоминают те, которые популярны в других странах Латинской Америки. Это разнообразные сладкие жареные пирожки, засахаренные фрукты, жареные в орехи. Отдельно следует упомянуть об аргентинском мороженом хеладо, которое часто готовят с мятой и другими пряными травами.

Основным напитком в Аргентине является мате, который местные жители пьют в огромных количествах. Готовят его из измельченных листьев парагвайского падуба. Мате отличается высоким содержанием , превосходно тонизирует и утоляет жажду. Подают его обычно в сосудах из тыквы-горлянки, которые носят название калебас.

Полезные свойства и противопоказания

При этом, ввиду популярности в Аргентине жареных блюд, людям, страдающим заболеваниями пищеварительной системы, с местными деликатесами стоит быть осторожными.

Кроме того, существует ряд противопоказаний для употребления самого популярного в Аргентине напитка — мате. Пить его категорически не рекомендуют гипертоникам, поскольку он может вызывать резкое повышение артериального давления. Также этот чай запрещен беременным и кормящим женщинам. Помимо этого, следует воздержаться от его употребления людям с очень лабильной нервной системой в связи с тем, что напиток обладает свойствами энергетика.

Готовим аргентинское рагу в тыкве

Для приготовления ароматного овощного рагу по-аргентински вам понадобятся следующие ингредиенты: тыква весом в один килограмм; две картофелины; одна морковь; один томат; небольшая луковица; половинка ; один початок кукурузы; треть чайной ложки кумина, столько же молотого кориандра; пара зубчиков ; четыре столовых ложки растительного масла; половина стакана красной ; 100 г ; половина пучка кинзы; и по вкусу.

Овощи помойте и просушите. У тыквы срежьте верхушку, вычистите семечки и мякоть. Смажьте ее снаружи и внутри растительным маслом и отправьте в разогретую до 180 градусов духовку на 40 минут.

Овощи нарежьте, влейте в глубокую сковородку две-три столовые ложки растительного масла. Обжарьте лук, морковь и картофель. После этого добавьте помидор, болгарский перец и выдавите чеснок. Обжаривайте еще около пяти минут. На следующем этапе добавьте предварительно промытую чечевицу и измельченную курагу. Влейте около литра и готовьте смесь около двадцати минут. Посолите, добавьте черный перец, кумин и кориандр, а также зернышки кукурузы, после чего протомите блюдо на огне еще около 10 минут. После этого добавьте в рагу измельченную кинзу и перемешайте.

Рагу поместите в тыкву и снова отправьте ее в духовку, теперь на четверть часа.

Подают блюдо прямо в тыкве, не раскладывая по тарелкам.

Готовим милянесу по-аргентински

Милянеса — это аргентинский шницель, который готовят из куриного филе. Он отличается неповторимым вкусом и ароматом благодаря использованию пряных трав и чеснока.

Для приготовления блюда вам понадобится: 400 г куриного филе; пара яиц; чайная ложка ароматных трав; пара зубчиков чеснока; половина чайной ложки морской соли; четыре столовых ложки муки; пять ложек панировочных сухарей; черный перец по вкусу; чайная ложка смеси любых пряных трав (например, тимьян и орегано) и растительное масло для жарки.

Взбейте яйца, добавьте соль, перец, пряности и выдавите чеснок. Тщательно перемешайте.

Обваляйте филе в муки, обмакните в кляр, после чего запанируйте в сухарях. Обжарьте на растительном масле до появления румяной корочки.

Готовые шницели выложите на бумажное полотенце, чтобы впиталось лишнее масло.

Подавать аргентинскую Милянесу следует с овощным салатом или же с картофельным пюре. Кроме того, шницель может использоваться для приготовления сэндвичей.

Готовим салат Ensalada rusa

Под красивым названием «Ensalada rusa», или «Русский салат» скрывается оливье. Впрочем, излюбленное блюдо российской кухни в Аргентине усовершенствовали на свой лад, сделав его более лаконичным.

В «оливье по-аргентински» всего три ингредиента: картофель, морковь и зеленый горошек. В магазинах страны можно даже найти специальную смесь для приготовления «Ensalada rusa».

Яйца в аргентинском блюде также используются, однако не в качестве ингредиента, а для декора — поверх салата выкладывают фигурки из белка или желтка.

В качестве основной заправки обычно выступает , существует также вегетарианской вариант с заправкой из растительного масла и уксуса. Некоторые гурманы добавляют в салат креветок и , а также обильно его перчат.

Для приготовления салата вам понадобится: 400 г картофеля, 50 г моркови, 100 г зеленого горошка, (можно взять либо свежий, либо консервированный). Также потребуется майонез и соль по вкусу.

Картошку отварить до мягкости. Горошек залить кипятком на пару минут. Морковь отваривать в течение десяти минут, чтобы она не успела стать мягкой.

Не дожидаясь, пока картошка полностью остынет, очистите ее и порежьте крупными кубиками. Порежьте морковь, добавьте горошек. Залейте овощи майонезом и дайте настояться в течение двух часов.

Что полезнее Аргентина или Лосось? Сравнительная таблица.

Овощи

Фрукты

Ягоды

Грибы

Молочные продукты, сыры

Мясные продукты

Рыба и морепродукты

Орехи

Мука и мучные изделия

Крупы, злаки, бобовые

Хлебопекарные и кондитерские изделия

Зелень

Специи и пряности

Сырье и добавки

Соки, вода, напитки

Алкоголь

Сосиски и колбасы

Рыбные консервы

Сладости

Яйца

Масла и жиры

Сухофрукты

Ловля нахлыстом, Аргентина — лоджи и направления »Outdoors International

Поездка № GDRC1

Дельта верховья реки Парана

Нахлыст мирового класса на Golden Dorado в рамках единственной программы Mother Ship в Аргентине!

Это одна из самых уникальных программ рыбалки Golden Dorado! Совершенно новый речной круизер — это роскошное живое на борту судно, которое было специально построено для обеспечения роскоши и комфорта рыболовам. Судно спроектировано таким образом, чтобы иметь возможность перемещаться там, где есть рыба в разные сезоны.Это позволяет рыболовам оставаться рядом с основными водоемами для рыбалки и сокращать ежедневные поездки. Дельта реки Парана — вторая по величине в Южной Америке после Амазонки. Он включает 4600 квадратных миль речного русла, задних бухт, лагун, берегов рек и местообитаний рыб. Обилие наживки в системе позволяет хищным рыбам, таким как Golden Dorado, процветать в этих водах.

Совместите рыбалку с проживанием мирового класса, первоклассными опытными гидами и удаленностью, и вы получите незабываемое приключение!

  • Программа только по базовым кораблям на всей территории Аргентины
  • Меньше ежедневных поездок в районы рыбалки = больше рыбалки!
  • Эксклюзивный доступ в глуши
  • Уникальные возможности для рыбалки и новые районы рыбалки ежедневно
  • Прочие виды рыб Паку, Пира Пита, Тарарира (Рыба-волк), Суруби, Чафалоте
  • Рыболовство круглый год, пик дорадо — с ноября по март. С октября по январь предлагается отличная рыбалка на волков, и ловить их на поппера — одно удовольствие.
  • Всего в 2,5 часах езды от Буэнос-Айреса!

Золотая дорадо

Золотая дорадо любит устраивать засаду на свою добычу, прячась в строениях или висящих в потоках речных каналов. Их агрессивный характер и акробатические манеры, смешанные с их единственным в своем роде золотистым цветом, делают эту рыбу одной из лучших пресноводных рыб для охоты! Совместите рыбалку с проживанием мирового класса, высококлассными опытными гидами и удаленностью, и вы получите незабываемое приключение! Если вам нравится охотиться на агрессивных хищных рыб, вам лучше включить золотую дорадо в свой список!

Дорадо в этой системе много.Если вы опытный рыболов, вы можете рассчитывать поймать 10-15 дорадо в день с шансами еще больше. Рыба находится в диапазоне от 3 до 7 фунтов, а рыба до 10 фунтов и более является повседневным явлением. Помните, что у золотых дорадо невероятно твердый рот, и требуется надежный набор крючков, чтобы удерживать их. Корабль-база дает гостям возможность ловить рыбу в самых удаленных водах с очень низким давлением. Хорошо представленные мухи и забросы на 30-50 футов заставят вас весь день участвовать в ожесточенных боях. Помимо Дорадо, в этой речной системе обитает много других хищных рыб.Эта экосистема имеет один из крупнейших миграционных потоков сабало, пехерри и сардин, которые являются основным источником пищи для этих хищников. Другие виды рыб, доступные рыболовам в системе реки Парана, — это Паку, Пира Пита, Паломета, Тарарира (рыба-волк), Суруби (большой сом), Чафалоте (Парана Паяра).

В этой поездке вам не о чем беспокоиться, а сосредоточиться на рыбалке и получить удовольствие от общения с одним из самых уважаемых и успешных экипировщиков в Аргентине.

Влияние факторов окружающей среды на микроорганизмы ~ LORECENTRAL

Изменения условий окружающей среды влияют на жизнь микроорганизмов. Физические, химические и биологические факторы окружающей среды могут ускорять или тормозить развитие микробов, изменять их свойства или даже вызывать смерть.

Факторы окружающей среды, которые оказывают наиболее заметное влияние на микроорганизмы, включают влажность, температуру, кислотность и химический состав среды, влияние света и других физических факторов.

Влажность

Микроорганизмы могут жить и развиваться только в среде с определенным содержанием влаги. Вода необходима для всех метаболических процессов микроорганизмов, для нормального осмотического давления в микробной клетке, для поддержания ее жизнеспособности. У разных микроорганизмов потребность в воде неодинакова. Бактерии в основном влаголюбивы, при влажности менее 20% их рост прекращается. Для плесени нижний предел влажности среды составляет 15%, а при значительной влажности воздуха и ниже.Осаждение водяного пара из воздуха на поверхность продукта способствует размножению микроорганизмов.

Когда содержание воды в среде уменьшается, рост микроорганизмов замедляется и может полностью прекратиться. Таким образом, сухие продукты могут храниться значительно дольше, чем продукты с повышенной влажностью. Сушка продуктов позволяет хранить их при комнатной температуре без охлаждения.

Некоторые микробы очень устойчивы к высыханию, некоторые бактерии и дрожжи в высушенном состоянии могут сохраняться до месяца и более.Споры бактерий и плесневых грибов сохраняют жизнеспособность в отсутствие влаги десятки, а иногда и сотни лет.

Температура

Температура — самый важный фактор для развития микроорганизмов. Для каждого из микроорганизмов существует минимальный, оптимальный и максимальный температурный режим для роста. По этому свойству микробы делятся на три группы:

  • психрофилов — это микроорганизмов, которые хорошо растут при низких температурах с минимумом -10-0 ° C, оптимумом при 10-15 ° C;
  • мезофилы — микроорганизмов, для которых оптимум роста наблюдается при 25-35 ° C, минимум при 5-10 ° C, максимум при 50-60 ° C;
  • термофилы — это микроорганизмов, которые хорошо растут при относительно высоких температурах с оптимальным ростом при 50-65 ° C, максимумом при температуре выше 70 ° C.

Большинство микроорганизмов относятся к мезофилам, для развития которых температура составляет 25-35 ° С. Поэтому хранение пищевых продуктов при такой температуре приводит к быстрому размножению в них микроорганизмов и порче продуктов. Некоторые микробы при значительном накоплении в продуктах могут привести к пищевым отравлениям человека. К мезофилам также относятся патогенные микроорганизмы, т.е. причины инфекционных заболеваний человека.

Низкие температуры замедляют рост микроорганизмов, но не убивают их.В охлажденных продуктах рост микроорганизмов медленный, но продолжается. При температуре ниже 0 ° C большинство микробов перестают размножаться; при замораживании продуктов рост микробов прекращается, часть из них постепенно отмирает. Установлено, что при температуре ниже 0 ° C большинство микроорганизмов переходят в состояние, подобное анабиозу, сохраняют жизнеспособность и с повышением температуры продолжают свое развитие. Это свойство микроорганизмов следует учитывать при хранении и дальнейшем приготовлении пищи. Например, сальмонеллы могут долго храниться в замороженном мясе, а после размораживания мяса они быстро накапливаются в благоприятных условиях до опасного для человека количества.

При воздействии высокой температуры, превышающей максимум выносливости микроорганизмов, происходит их гибель. Бактерии, не обладающие способностью образовывать споры, погибают при нагревании во влажной среде до 60-70 ° C за 15-30 минут, до 80-100 ° C — через несколько секунд или минут. Споры бактерий обладают гораздо более высокой термостойкостью.Они способны выдерживать 100 ° C в течение 1-6 часов, при температуре 120-130 ° C споры бактерий во влажной среде погибают за 20-30 минут. Споры плесени менее термостойки.

Термическая кулинарная обработка пищевых продуктов в общепите, пастеризация и стерилизация пищевых продуктов в пищевой промышленности приводят к частичной или полной (стерилизации) гибели вегетативных клеток микроорганизмов.

При пастеризации продукт подвергается минимальному температурному воздействию. В зависимости от температурного режима различают низкую и высокую пастеризацию.

Низкая пастеризация проводится при температуре не выше 65-80 ° С, не менее 20 минут для большей сохранности продукта.

Высокая пастеризация — кратковременное (не более 1 мин) воздействие на пастеризованный продукт температурой выше 90 ° С, которое приводит к гибели патогенной неспорообразующей микрофлоры и в то же время не влекут за собой существенные изменения природных свойств пастеризованных продуктов.Пастеризованные продукты нельзя хранить без холода.

Стерилизация обеспечивает освобождение продукта от всех форм микроорганизмов, включая споры. Стерилизация консервов осуществляется в специальных аппаратах — автоклавах (под давлением пара) при температуре 110-125 ° С в течение 20-60 минут. Стерилизация предусматривает возможность длительного хранения консервов. Молоко стерилизуют сверхвысокой температурой (при температуре выше 130 ° C) в течение нескольких секунд, что позволяет сохранить все полезные свойства молока.

Реакция среды

Жизнедеятельность микроорганизмов зависит от концентрации ионов водорода (H + ) или гидроксильных (OH ) в субстрате, на котором они развиваются. Для большинства бактерий наиболее предпочтительна нейтральная (pH около 7) или слабощелочная среда. Заплесневелые грибы и дрожжи хорошо растут при слабокислой реакции среды. Высокая кислотность среды (pH ниже 4,0) предотвращает развитие бактерий, но плесень может продолжать расти в более кислой среде.Практическое применение имеет подавление роста гнилостных микроорганизмов при закислении окружающей среды. Добавка уксусной кислоты используется при мариновании продуктов, что препятствует процессам гниения и позволяет сохранять продукты. Молочная кислота, образующаяся при тушении, также подавляет рост гнилостных бактерий.

Концентрация соли и сахара

Поваренная соль и сахар издавна использовались для повышения устойчивости продуктов к микробным повреждениям и улучшения сохранности продуктов.

Повышение содержания растворенных веществ (соли или сахара) в питательной среде влияет на величину осмотического давления внутри микроорганизмов, вызывает их обезвоживание. При увеличении концентрации поваренной соли в субстрате более 3-4% размножение многих, в том числе гнилостных, микроорганизмов замедляется, при концентрации более 7-12% — прекращается.

Некоторые микроорганизмы нуждаются для своего развития в высоких концентрациях соли (20% и выше).Их называют соленолюбивыми, или галофилами. Они могут повредить соленую пищу.

Высокие концентрации сахара (выше 55-65%) останавливают размножение большинства микроорганизмов, его используют при приготовлении варенья, джема или варенья из фруктов и ягод. Однако эти продукты также могут быть повреждены в результате размножения осмофильных плесневых грибов или дрожжей.

Блеск

Некоторым микроорганизмам для нормального развития нужен свет, но для большинства из них он губителен. Ультрафиолетовые лучи солнца обладают бактерицидным действием, т. Е. При определенных дозах облучения приводят к гибели микроорганизмов.Бактерицидные свойства ультрафиолетовых лучей ртутно-кварцевых ламп используются для дезинфекции воздуха, воды и некоторых пищевых продуктов. Инфракрасные лучи также могут вызвать гибель микробов из-за теплового воздействия. Воздействие этих лучей используется при термической обработке изделий. Негативное воздействие на микроорганизмы могут оказывать электромагнитные поля, ионизирующее излучение и другие физические факторы окружающей среды.

Химические факторы

Некоторые химические вещества могут оказывать вредное воздействие на микроорганизмы.Химические вещества, обладающие бактерицидным действием, называются антисептиками . К ним относятся дезинфицирующие средства (отбеливатели, гипохлориты и др.), Используемые в медицине, пищевой промышленности и общественном питании.

Некоторые антисептики используются в качестве пищевых добавок (сорбиновая, бензойная кислоты и др.) При производстве соков, икры, кремов, салатов и других продуктов.

Биологические факторы

Между разными микроорганизмами могут быть установлены разные взаимоотношения: симбиоз — это взаимовыгодные отношения; метабиоз — жизнедеятельность одного за счет другого без причинения вреда; паразитизм — жизнедеятельность одного за счет другого с причинением ему вреда; антагонизм — один из видов микроорганизмов подавляет развитие другого, что может привести к гибели микробов.Например, развитие молочнокислых бактерий подавляет рост гнилостных, эти антагонистические отношения используются при заквашивании овощей или для поддержания нормальной микрофлоры в кишечнике человека.

Антагонистические свойства некоторых микроорганизмов объясняются их способностью выделять в окружающую среду вещества, обладающие антимикробным (бактериостатическим, бактерицидным или фунгицидным) действием, антибиотики. Антибиотики производятся в основном грибами, реже бактериями, они оказывают специфическое действие на определенные виды бактерий или грибов (фунгицидное действие). Антибиотики используются в медицине (пенициллин, левомицетин, стрептомицин и др.), В животноводстве в качестве кормовой добавки, в пищевой промышленности для консервирования продуктов (низин).

Фитонциды — вещества, содержащиеся во многих растениях и пищевых продуктах (лук, чеснок, редис, хрен, специи и т. Д.), Обладают антибиотическими свойствами. Фитонциды включают эфирные масла, антоцианы и другие вещества. Они способны вызывать гибель патогенных микроорганизмов и гнилостных бактерий.

В яичном белке, рыбьей икре, слезах, слюне содержится лизоцим — антибиотическое вещество животного происхождения.

Границы | Новый постбиотик из Lactobacillus rhamnosus GG с благоприятным действием на барьерную функцию кишечника

Введение

Кишечный барьер — первая защита от вредоносных микроорганизмов и антигенов, вторгающихся в кишечник (Martens et al., 2018). Это многослойная система, состоящая в основном из слоя слизи, продуцируемого бокаловидными клетками, за которым следует монослой эпителиальных клеток, образующих плотное соединение эпителия (TJ) (Turner, 2009). Иммунная система кишечника и микробиота также являются важными компонентами барьерной функции кишечника (König et al., 2016). Нарушение функции кишечного барьера может привести к перемещению патогенов, аллергенов и люминальных токсинов через эпителиальный слой в собственную пластинку, а затем в мезентериальные лимфатические узлы и даже может проникнуть в кровоток и распространиться на другие стерильные органы. Этот процесс играет решающую роль в патогенезе ряда заболеваний, связанных с кишечником, включая синдром раздраженного кишечника, воспалительные заболевания кишечника, острую печеночную недостаточность и внекишечные инфекционные заболевания (Martín et al., 2016; Xiong et al., 2016; Брон и др., 2017; Ванкамельбек и Вермейр, 2017; Assimakopoulos et al., 2018). Таким образом, подходы, направленные на укрепление кишечного барьера, могут представлять терапевтический интерес как для профилактики, так и для лечения этих патологий.

Одной из эффективных стратегий усиления кишечного барьера является введение пробиотиков, которые определяются как «живые микроорганизмы, которые при введении в адекватных количествах приносят пользу здоровью хозяина» (FAO and WHO, 2001). Растет количество данных, подтверждающих эффективность некоторых штаммов пробиотиков в защите целостности кишечного барьера и его восстановлении после повреждения (Zuo et al., 2014; Lopetuso et al., 2015; Marchesi et al., 2016; Bron et al., 2017). Например, VSL # 3, смесь лактобактерий и бифидобактерий ( Bifidobacterium infantis , Bifidobacterium breve , Bifidobacterium longum , Lactobacillus plantarum , Lactobacillus plantarum , Lactobacillus plantarum , Lactobacillus casei. Bulgaricus и Lactobacillus acidophilus ) могут предотвращать увеличение кишечной проницаемости на различных моделях заболеваний, а также оказывает положительное влияние на функцию кишечного барьера и болезненные состояния в клинических исследованиях (Biagioli et al., 2018). Lactobacillus rhamnosus GG (LGG), грамположительный комменсальный обитатель, выделенный из кишечника здорового человека, представляет собой хорошо описанный пробиотический штамм как на животных моделях, так и в клинических испытаниях (Segers and Lebeer, 2014). Он продемонстрировал защитное действие на барьерные функции кишечника, такие как иммунная модуляция и поддержание целостности кишечника. Его защитный эффект от кишечного барьера может проявляться путем предотвращения вызываемого провоспалительными цитокинами пагубного воздействия на структуру и функцию TJ кишечника (Donato et al., 2010) или увеличения экспрессии кишечного муцина (MUC2) для подавления присоединения энтеропатогенной Escherichia coli (Mack et al., др., 1999). С момента открытия появляется все больше данных, свидетельствующих о том, что он обладает клиническими преимуществами при желудочно-кишечных заболеваниях, например, целиакии, воспалительном заболевании кишечника, неалкогольной жировой болезни печени и диарее (Yoda et al., 2012; Орландо и др., 2014; Ritze et al., 2014; Сегерс, Лебеер, 2014; Hill et al., 2018). Однако, несмотря на хорошо изученную роль пробиотиков в защите кишечного барьера, молекулярные механизмы действия пробиотиков сложны и остаются в значительной степени неизвестными. Кроме того, проблемы, связанные с их неопределенной биодоступностью, риском инфицирования и возможностью передачи гена устойчивости к антибиотикам, препятствуют использованию пробиотиков в клинической терапии (Doron and Snydman, 2015; Sharma and Im, 2018; Zawistowska-Rojek and Tyski, 2018).

Недавно были получены данные, свидетельствующие о том, что эффекторные молекулы, полученные из пробиотиков, обладают потенциалом оказывать защитное действие на кишечник таким же образом, как и их родительские пробиотики (Yan et al., 2007; Mazmanian et al., 2008; Sanchez et al., 2010; Konishi et al., al., 2016; Quévrain et al., 2016; Lebeer et al., 2018). Идентификация и характеристика этих «постбиотиков», относящихся к растворимым факторам (продуктам или побочным продуктам метаболизма), секретируемым живыми бактериями или высвобождаемым после бактериального лизиса с физиологическими преимуществами для хозяина, стали новой стратегией поддержания здоровья кишечника (Tsilingiri and Rescigno, 2012 ; Cicenia et al. , 2014; Суэц и Элинав, 2017; Агилар-Тоала и др., 2018). Наше предыдущее исследование продемонстрировало, что супернатант культуры LGG (LCS) способствует развитию у новорожденных кишечной защиты и защищает новорожденных крыс от оральной инфекции E. coli K1 (He et al., 2017). Однако идентичность биологически активных факторов в LCS еще не определена. Предварительные эксперименты показали, что обработка протеиназой К может подавлять положительный эффект LCS. Это побудило нас разработать тандемный масс-спектрометрический анализ жидкостной хроматографии (ЖХ-МС / МС) супернатанта с целью выявления потенциального биоактивного белка.В этом исследовании мы сообщили о новом секретируемом белке, производном от LGG, под названием HM0539, который оказывает благотворное влияние на барьерную функцию кишечника.

Материалы и методы

Заявление об этике

Это исследование было одобрено Комитетом по медицинской этике Южного медицинского университета (Гуанчжоу, Китай) и проводилось в соответствии с инструкциями по защите животных. Были приложены все усилия, чтобы уменьшить количество используемых животных. 8-10-недельных мышей C57BL / 6 (24-28 г) и беременных крыс Sprague-Dawley были получены из экспериментального центра животных Южного медицинского университета (номер протокола: L2018018).Все животные были свободны от патогенов и содержались в помещении для животных при строгом 12-часовом цикле свет / темнота. Все операции проводились под анестезией кетамином и лидокаином, и прилагались все усилия, чтобы минимизировать страдания.

Бактериальная культура, подготовка и обработка ЖХ

Супернатант культуры LGG

готовили, как описано ранее (He et al., 2017). LGG (ATCC 53103) был любезно предоставлен профессором Sheng-He Huang (Детская больница Лос-Анджелеса, Университет Южной Калифорнии) и размножался микроаэрофильно в бульоне Де Ман, Рогоза и Шарпа (MRS) (Guangdong Huankai Microbial Science and Technology Co.Ltd., Гуанчжоу, Китай) при 37 ° C. LGG инкубировали в 5 мл бульона MRS при температуре 37 ° C в течение 18 ч в микроаэрофильных условиях в течение трех поколений перед приготовлением LCS. После этого LGG инокулировали полосами на агар MRS и инкубировали при 37 ° C в течение 36 часов в микроаэрофильных условиях. Отдельную колонию отбирали кончиком микропипетки, добавляли в коническую колбу с 300 мл бульона MRS и инкубировали при 37 ° C в течение 24 часов в микроаэрофильных условиях. Затем культуральный супернатант собирали и концентрировали с помощью устройства для ультрафильтрации (Merck Millipore) с отсечкой мол. Массы 3000 дальтон.Для предварительного определения характеристик биоактивной молекулы в культуральном супернатанте LCS предварительно обрабатывали протеиназой K, карбогидразой или ДНКазой в соответствии со следующим процессом (Harb et al., 2013): (1) обработка протеиназой K: 1 мл LCS расщепляли с помощью 10 мкл протеиназы К (52 Ед / мг, Solarbio, Пекин, Китай) в течение 10 мин при 37 ° C. Затем добавляли 20 мкл ингибитора протеиназы. (2) Обработка ДНКазой: 1 мл LCS расщепляли 10 мкл ДНКазы (Tiangen Biotech Co., Ltd., Пекин, Китай) в течение 25 минут при 37 ° C.Затем добавляли 10 мкл инактиватора ДНКазы. (3) Обработка β-глюкозидазой и целлюлазой: 1 мл LCS расщепляли 10 мкл β-глюкозидазы и 10 мкл целлюлазы (Sigma-Aldrich, Германия) в течение 4 ч при 50 ° C. Все продукты переваривания собирали и использовали в эксперименте, стимулирующем муцин, как описано ниже.

Анализ ЖХ / МС-МС

Супернатант культуры

LGG осаждали с использованием трихлоруксусной кислоты и разделяли с помощью SDS-PAGE. Затем полосу образца белка из LCS вырезали и обрабатывали для расщепления в геле трипсином для секвенирования (Promega; Pharmacia Biotech), как описано ранее (Katayama et al., 2001). После этого высушенные образцы ресуспендировали в 5% ацетонитриле и 0,1% муравьиной кислоте в воде для анализа методом ЖХ-МС / МС. ЖХ / МС-МС выполняли с расщепленными пептидами на колонке ChromXP C18 (75 мкм × 15 см, C18, 3 мкм 120 Å) с распылительным наконечником. Сбор данных осуществляли с помощью системы Triple TOF 5600 (AB SCIEX, США), оснащенной источником Nanospray III (AB SCIEX, США) и вытянутым кварцевым наконечником в качестве эмиттера (New Objectives, США).

Получение и очистка рекомбинантного белка HM0539 с меткой His

Вкратце, геномная ДНК LGG была выделена и использована в качестве матрицы для ПЦР.Учитывая трансмембранную структуру на N-конце HM0539, праймеры, нацеленные на 51-357 аминокислотные последовательности, были разработаны для амплификации фрагмента внеклеточного белка:

F: 5′-GTAGAATTCGTTAACGCGGCAACGAAAG

R: 5′-CGGGCCTCGAGTTAGTTGATCACTTCAA.

продуктов ПЦР очищали с использованием набора GenElute TM PCR Clean-Up Kit (Sigma-Aldrich), а затем расщепляли EcoR I и Xho I с последующим лигированием к тем же сайтам расщепления рестрикционным ферментом pET-31a. (+) (Новаген).Рекомбинантной плазмидой трансформировали E. coli DH5α (Tiangen Biotech Co., Ltd., Пекин, Китай). После инкубации колонии устойчивых к канамицину бактерий лизировали для ПЦР-анализа. Экспрессионная плазмида, продуцирующая HM0539, была подтверждена секвенированием ДНК и трансформирована в E. coli BL21 (DE3) (Tiangen Biotech Co., Ltd., Пекин, Китай). Рекомбинантный белок HM0539 с гистидиновой меткой был сверхэкспрессирован посредством индукции 0,5 мМ изопропил-β- D -тиогалактозида при 37 ° C и очищен с использованием набора для очистки белков с гистидиновыми метками (растворимый белок, CW0894, CWBioTech, Пекин, Китай), согласно данным инструкции производителя.Потенциальный эндотоксин HM0539 был удален с использованием смолы в соответствии с инструкциями поставщика (смола EndotoxinOUT; Sangon Biotech, Шанхай, Китай).

Культура клеток и методы лечения

Линия эпителиальных клеток кишечника Caco-2 была получена из Шанхайского института клеточной биологии (Шанхай, Китай) и выращена при 37 ° C и 5% CO. 2 в минимальной необходимой среде Игла, содержащей 10% инактивированной нагреванием фетальной телячьей сыворотки (FBS). , PAN Biotech, Aidenbach, Германия), пенициллин (100 единиц / мл, HyClone, США) и стрептомицин (100 мкг / мл, HyClone, США).Чтобы позволить Caco-2 полностью дифференцироваться, клетки выращивали в течение минимум 12 дней (Wang et al., 2011). Чтобы выявить положительный эффект HM0539, мы засевали Caco-2 в 24-луночные планшеты для периодического окрашивания по Шиффу (PAS), иммунофлуоресцентного анализа и определения трансэпителиального электрического сопротивления (TEER); и 6-луночные планшеты для вестерн-блоттинга. Дифференцированный Caco-2 инкубировали с разными концентрациями бычьего сывороточного альбумина (контроль, 50 нг / мл) или HM0539 (50 нг / мл) в течение 12 часов. После этого монослои Caco-2 стимулировали фактором некроза опухоли-α (TNF-α, 10 нг / мл, Sigma-Aldrich) или липополисахаридом (LPS, 1 мкг / мл, Sigma-Aldrich).После 6-часовой стимуляции монослои Caco-2 наносили для окрашивания PAS, как описано ниже. Экспрессию ZO-1, окклюдина и MUC2 определяли с помощью вестерн-блоттинга или иммунофлуоресцентного окрашивания.

Анализ PAS

Для колориметрического метода обработанные монослои Caco-2 собирали, лизировали в буфере для лизиса для анализа радиоиммунопреципитации и обрабатывали, как описано ранее (Wang et al., 2014). Клеточный лизис собирали и центрифугировали при 12000 g в течение 10 минут при 4 ° C.Собирали растворимые ингредиенты в супернатанте и определяли содержание белка с помощью набора для анализа бицинхониновой кислоты (Beyotime Institute of Biotechnology, Китай). После этого 50 мкг белка смешивали с 0,1% периодной кислотой в 96-луночном микротитровальном планшете и инкубировали в течение 2 ч при 37 ° C с последующим добавлением равного объема реагента Шиффа в течение 30 мин в темноте при комнатной температуре. Производство муцина контролировали при 550 нм с помощью считывающего устройства для микропланшетов. Все образцы анализировали в трех экземплярах.

Для обнаружения муцина, покрывающего монослои Caco-2, обработанные клетки фиксировали 4% параформальдегидом в течение 10 мин при комнатной температуре.После этого следовало несколько раз промывать дистиллированной водой и окрашивать с использованием набора для окрашивания PAS (Solarbio Science & Technology Co., Ltd., Пекин, Китай) в соответствии с инструкциями производителя. После этого все монослои Caco-2 контрастировали гематоксилином и визуализировали с помощью световой микроскопии.

Вестерн-блоттинг для измерения экспрессии белка

Клетки лизировали непосредственно 200 мкл загрузочного буфера 1 × SDS-PAGE. Лизаты клеток разделяли с помощью SDS-PAGE и переносили на поливинилидендифторидные мембраны (размер пор 0,01 мкм).45 мкм, Millipore, США). Затем мембраны блокировали 5% (мас. / Об.) Обезжиренным молоком в буфере TBST [50 мМ Трис / HCl, pH 7,4–7,6, 150 мМ NaCl и 0,1% (об. / Об.) Твин-20] на 1 ч, с последующей инкубацией в первичных антителах, разведенных в 5% обезжиренном молоке в TBS-Tween-20 (TBST), в течение 12 ч при 4 ° C. После этого мембраны промывали и зондировали соответствующим вторичным антителом, конъюгированным с пероксидазой хрена (HRP), разведенным в 5% обезжиренном молоке-TBST в течение 1 часа. Экспрессию антигена визуализировали с помощью реагента с усиленной хемилюминесценцией (Pierce Biotechnology, Рокфорд, Иллинойс, США).Используемые первичные антитела следующие: кроличьи анти-MUC2 (1: 1000), кроличьи анти-ZO-1 (1: 2000), кроличьи анти-окклюдин (1: 1000) и кроличьи анти-β-актин (1: 10000). ) (Proteintech Group, Чикаго, Иллинойс, США).

Измерение TEER

Клетки Caco-2 высевали в 24-луночные вставки Transwell (размер пор 3 мкм, диаметр 6,5 мм, Corning Costar Corp., США) и культивировали в течение 19–21 дней. Питательную среду заменяли каждые 2 дня. Целостность монослоев Caco-2 оценивали путем измерения TEER (EVOMAX, World Precision Instruments, США).Чтобы исследовать защитный эффект HM0539 против TNF-α или LPS-индуцированного нарушения целостности кишечника, монослои Caco-2 предварительно обрабатывали 50 нг / мл HM0539 в течение 12 часов, после чего добавляли TNF-α (10 нг / мл) или ЛПС (1 мкг / мл). Значения TEER определялись через 0, 1, 2, 3, 4 и 5 ч после обработки TNF-α или LPS. Эксперименты проводили в трех повторностях.

Система доставки лекарственного средства пектин / зеин-гидрогель

Для доставки HM0539 в толстую кишку использовали систему доставки пектин / зеиновых шариков, поскольку они защищают HM0539 от атаки протеазы.Гранулы пектина / зеина получали, как описано ранее (Shen et al., 2018). Сначала 1% (мас. / Об.) Зеин (Sigma-Aldrich, США) растворяли в 85% -ном растворе этилового спирта (добавляя 0,5% CaCl 2 , мас. / Об.) Для приготовления раствора зеина. Между тем, HM0539 с меткой His добавляли к 6% раствору пектина (вес / объем, растворять в дистиллированной воде) для приготовления раствора пектин / HM0539. После этого при комнатной температуре раствор пектина / HM0539 вдыхали в шприц с иглой 23G и осторожно капали (приблизительно 50 мкл / капля) в раствор зеина.Гранулы собирали после затвердевания в растворе зеина, промывали несколько раз дистиллированной водой, сушили на воздухе при комнатной температуре и хранили при 4 ° C. Гранулы пектина / зеина без HM0539 получали одновременно в качестве контролей. Согласно предыдущему исследованию (Yan et al., 2011), шарики со средним размером 2 мм содержали 5 мкг белка.

Модель E. coli Заражение K1 пероральным путем

Escherichia coli Инфекция K1 пероральным путем у новорожденных крыс была индуцирована, как описано в нашем предыдущем исследовании (He et al., 2017). Двенадцать неонатальных крыс объемом 2–3 л были объединены и случайным образом разделены на две группы ( n = 6). Чтобы исследовать влияние HM0539 на созревание защиты кишечника новорожденных, новорожденным крысам вводили через желудочный зонд контрольный пектин / зеин или гранулы пектина / зеина, содержащие HM0539, один раз в день в течение 3 дней без инфекции E. coli K1. Всех крыс умерщвляли через 3 дня лечения. Экспрессию маркера пролиферации эпителиальных клеток кишечника Ki67 и маркера дифференцировки MUC2, а также муцина и ZO-1 определяли с помощью иммуногистохимического анализа и анализа PAS.Чтобы исследовать, может ли HM0539 повышать устойчивость новорожденных крыс к оральной инфекции E. coli K1, животным вводили через желудочный зонд контрольный пектин / зеин или гранулы пектина / зеина, содержащие HM0539, один раз в день в течение 3 дней. После этого всем крысам вводили через зонд E. coli K1 (100 мкл, 5 × 10 9 колониеобразующих единиц, КОЕ). Через шестьдесят часов после обработки E. coli K1 всех крыс анестезировали кетамином и лидокаином. Образцы крови и спинномозговой жидкости (CSF) собирали в асептических условиях и высевали на агар для инфузии мозга и сердца с рифампицином (100 мкг / мл) для подсчета бактерий.Для оценки кишечной проницаемости крысы получали флуоресцеинизотиоцианат (FITC) -декстран (Sigma-Aldrich, MW 4000, 60 мг / кг веса тела) перорально за 4 часа до умерщвления. Плазму собирали и интенсивность флуоресценции FITC измеряли с использованием флуоресцентного спектрофотометра (длина волны возбуждения = 485 нм, длина волны излучения = 535 нм).

Декстрансульфат натрия (DSS) — Модель колита и лечение

Двадцать четыре мыши C57BL / 6 (возраст 8–10 недель, 24–28 г) были случайным образом разделены на три группы ( n = 8): контрольная группа, группа DSS-колита и группа HM0539 + DSS- группа колитов.В день 1 контрольная группа и группа с DSS-колитом получали через желудочный зонд контрольный пектин / зеин один раз в день в течение 9 дней, тогда как группы HM0539 + DSS получали через желудочный зонд пектин / зеин, содержащий HM0539. С 3 по 9 день питьевую воду в группе DSS-колита и HM0539 + DSS-колита заменили на 3% DSS (вес / объем, 40 кДа; Aladdin, Шанхай, Китай) в воде, тогда как контрольной группе вводили с обычной питьевой водой. Затем всем мышам давали обычную питьевую воду в течение 2 дней. Во время лечения DSS изменение массы тела регистрировалось ежедневно.На 12 день всех мышей умерщвляли, вырезали их толстую кишку и измеряли длину. Ткани толстой кишки гомогенизировали и лизировали для вестерн-блоттинга для определения экспрессии MUC2 и ZO-1. Некоторые ткани толстой кишки фиксировали формалином при комнатной температуре и заливали для окрашивания гематоксилин-эозином (HE) и иммуногистохимического анализа.

Модель LPS- D -галактозамин (LPS / GalN) и лечение

Двадцать одна мышь C57BL / 6 (возраст 8–10 недель, 24–28 г) была случайным образом разделена на три группы ( n = 7) с различным лечением следующим образом: контрольная группа, группа LPS / GalN и HM0539 + LPS. / Группа ГалН.С 1 по 7 дни и контрольная группа, и группа LPS / GalN получали через желудочный зонд контроль пектина / зеина один раз в день в течение 7 дней, тогда как группу HM0539 + LPS / GalN кормили через желудочный зонд пектином / зеином, содержащим HM0539. На 8 день всем мышам, кроме контрольной группы, внутрибрюшинно вводили ЛПС (40 мкг / кг, из E. coli O55: B5, Sigma-Aldrich, США) и D -галактозамин (360 мг / кг. , Aladdin, Шанхай, Китай), тогда как контрольной группе внутрибрюшинно вводили равный объем физиологического раствора.Для изучения транслокации бактерий через кишечный барьер всех мышей умерщвляли через 24 часа, их печень и брыжеечные лимфатические узлы (MLN) собирали в асептических условиях и гомогенизировали и помещали в пластину на агаре для инфузии сердца и мозга. Все планшеты инкубировали в анаэробных условиях в течение 48 ч при 37 ° C. Для оценки кишечной проницаемости мыши перорально получали FITC-декстран (Sigma-Aldrich, MW 4000, 60 мг / кг массы тела) за 4 часа до умерщвления. Уровни FITC в крови измеряли, как описано выше.

Гистопатология и иммуногистохимия

Свежую ткань печени или толстой кишки фиксировали в 10% формалине в течение 2 дней, а затем обрабатывали для разделения и окрашивания стандартными гистологическими методами.Срезы печени и тонкой кишки окрашивали НЕ и оценивали под световой микроскопией.

Для иммуногистохимического окрашивания парафиновые срезы депарафинизировали и регидратировали в соответствии со стандартными протоколами. Для извлечения антигена срезы кипятили с 0,01 М цитратным буфером (pH 6,0) в течение 30 мин. После этого срезы промывали и погружали в 3% перекись водорода / метанол на 30 мин при комнатной температуре. Затем срезы блокировали 1% бычьим сывороточным альбумином и инкубировали с кроличьими анти-MUC2 (1: 200) или кроличьими анти-ZO-1 (1: 200, Proteintech Group, Чикаго, Иллинойс, США).Затем срезы промывали и инкубировали с соответствующими вторичными антителами, промывали и визуализировали с использованием DAB (3,3 = -диаминобензидин) с контрастным красителем гематоксилином. Оптическую плотность иммуноокрашенных областей определяли количественно с использованием программного обеспечения ImageJ (Национальные институты здравоохранения США).

Функциональные тесты печени

Образцы крови были извлечены и центрифугированы после декапитации при 3000 g в течение 10 минут для сбора сыворотки. Уровни аланинаминотрансферазы (ALT) и аспартатаминотрансферазы (AST) в сыворотке определяли количественно с использованием набора для анализа ALT и набора AST (Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute, Jiangsu, China) в соответствии с инструкциями поставщика.Данные были получены с использованием ридера для микротитрационных планшетов, установленного на 510 нм. Все образцы анализировали в трех экземплярах.

Статистический анализ

Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка (SEM). Анализ между двумя группами проводился с помощью непарного двустороннего критерия Стьюдента t . Анализ, включающий более двух групп, изучали двусторонним односторонним дисперсионным анализом (ANOVA) с множественным сравнением post hoc анализ. Все статистические анализы проводились с использованием программного обеспечения GraphPad Prism версии 7.0. P <0,05 было определено как статистически значимое.

Результаты

Характеристика биоактивных факторов из LCS

Чтобы получить первое представление о природе биоактивного фактора, LCS предварительно обрабатывали протеазой K, ДНКазой или ферментами, переваривающими углеводы, с последующей оценкой его способности усиливать муцин с помощью анализа PAS. Мы обнаружили, что только LCS, обработанные протеазой K, демонстрировали значительное снижение продукции муцина (рисунки 1A, C), подразумевая, что биоактивные метаболиты LGG могут быть разновидностью белка.Аналогичный результат был получен с помощью вестерн-блоттинга MUC2 (рис. 1В), подтверждающий открытие, описанное выше.

Рис. 1. Характеристика растворимого белка, обнаруженного с помощью LCS. LCS предварительно обрабатывали протеиназой K, ДНКазой или карбогидразой, затем расщепленные продукты применяли для обработки монослоев Caco-2, обнаруживали растворимый муцин (A) и покрытую муцином поверхность Caco-2 ( C , верхняя панель). с использованием анализа PAS экспрессию MUC2 ( B , средняя и нижняя панели) оценивали с помощью иммуноблоттинга, β-актин использовали в качестве контроля нагрузки. (D). LCS осаждали и разделяли с помощью SDS-PAGE (дорожка 2). Данные представлены как среднее ± стандартная ошибка среднего; ∗∗ P <0,01; NS, статистической значимости нет.

Полезная активность LCS чувствительна к обработке протеазой K, что позволяет нам проанализировать белковый состав LCS с помощью SDS-PAGE и окрашивания кумасси синим. Наблюдались четыре видимые полосы с молекулярными массами примерно 80, 60, 50 и 37 кДа (рис. 1D). После этого гель вырезали и расщепляли для анализа белкового состава с помощью LC-MS / MS.Результат показал, что всего было идентифицировано 58 белков, и десять из наиболее распространенных были перечислены в таблице 1. Поскольку p40 и p75 являются наиболее распространенными белками, секретируемыми LGG, о которых ранее сообщалось Yan et al. (2007), мы задаемся вопросом, существуют ли эти два белка в нашей LCS. Однако мы обнаружили только p75, гидролазу, ассоциированную с клеточной стенкой (номер доступа gi | 199589812). Поскольку предыдущие исследования продемонстрировали, что p75 не является основным биоактивным фактором, секретируемым LGG (Yan and Polk, 2012), мы, таким образом, сосредоточили внимание на гипотетическом белке HMPREF0539_2242 (сокращенно HM0539 в этом исследовании), наиболее распространенном белке, идентифицированном в LCS (таблицы 1 , 2).При поиске HM0539 с использованием банка данных белков NCBI мы обнаружили, что это предполагаемый белок с 37,3 кДа, расчетная изоэлектрическая точка = 9,22. Поиск BLAST показал, что аминокислотная последовательность HM0539 на 92% сходна с гидролазой из L. rhamnosus (таблица 2 и дополнительная фигура S1A). Выравнивание последовательностей HM0539 с его другими аналогами LGG (p40 и p75) выявило низкую идентичность последовательностей с 13,7 и 18,9% соответственно (дополнительная фигура S1A). Полноразмерная кодирующая ДНК белка HM0539 показана в дополнительной таблице S1.Информация о геномном локусе, который содержит HM0539, показана на дополнительном рисунке S2. Геномный поиск BLAST последовательностей, доступных в базе данных GenBank, показал, что гены, кодирующие гомологи HM0539, распространяются в геномах ряда штаммов L. rhamnosus и L. casei . Результаты сравнения аминокислот этих наилучшим образом согласованных гомологичных белков с HM0539 показаны в дополнительной таблице S2 (с использованием онлайн-программного обеспечения Sequence Manipulation Suite) и на дополнительном рисунке S3 (выровнены с использованием программы DNAMAN).Биоинформатический анализ с использованием SignalP-4.1 и TMHMM server 2.0 показал, что HM0539 содержит сигнальный пептид (1–53 аминокислотных остатка) и трансмембранный участок (29–46 аминокислотных остатков), соответственно (дополнительные рисунки S1B, C). Наконец, для дальнейшего изучения биоактивности HM0539 мы рекомбинировали и очищали его с использованием системы His-tag / Ni-NTA (дополнительный рисунок S1D).

Таблица 1. Десять наиболее распространенных белков, обнаруженных с помощью ЖХ-МС / МС анализа.

Таблица 2. Внутренние пептидные последовательности HM0539, обнаруженные с помощью анализа LC / MS / MS.

Лечение HM0539 защищает от индуцированного LPS и TNF-α-индуцированного повреждения кишечного барьера in vitro

Затем мы оценили влияние HM0539 на продукцию муцина в кишечнике in vitro . Монослои Caco-2 инкубировали с различными концентрациями HM0539 (0–100 нг / мл), и было обнаружено образование муцина в растворимых ингредиентах или покрытых монослоями Caco-2. Мы обнаружили, что HM0539 может значительно индуцировать продукцию муцина и экспрессию MUC2 дозозависимым образом (рисунки 2A – C), что означает, что HM0539 имеет такую ​​же биоактивность, что и LCS, в отношении способности усиливать муцин.Затем мы исследовали, может ли HM0539 защищать кишечный барьер от повреждения, вызванного LPS или TNF-α. Вестерн-блот-анализ показал, что стимуляция LPS или TNF-α значительно снижает экспрессию кишечного белка TJ (ZO-1, окклюдин) и кишечного муцина (MUC2) (рис. 2D). Однако предварительная обработка монослоя Caco-2 HM059, очевидно, может отменить LPS- или TNF-α-индуцированное подавление этих белков. Интересно, что при использовании бензил-α-GalNAc, мощного ингибитора муцина, защитный эффект HM0539 на экспрессию ZO-1 был подавлен, что указывает на то, что HM0539 может частично защищать ZO-1 за счет увеличения продукции муцина в кишечнике (рис. 2D).Кроме того, иммунофлуоресцентное окрашивание ZO-1 показало, что контроль, HM0539 и монослой Caco-2, обработанный бензил-α-GalNAc, демонстрируют типичную картину окрашивания ZO-1. Однако эта типичная морфология была нарушена, когда Caco-2 стимулировали LPS или TNF-α (рис. 2E). Напротив, предварительная обработка Caco-2 HM0539 восстанавливает типичную морфологию ZO-1 (рис. 2E). Наконец, мы отметили, что стимуляция LPS или TNF-α снижает TEER монослоя Caco-2, что является полезным показателем для оценки целостности кишечного барьера.Точно так же предварительная обработка Caco-2 HM0539 подавляет LPS- или TNF-α-индуцированное снижение TEER, предполагая, что HM0539 может поддерживать целостность кишечника против LPS- и TNF-α-индуцированного нарушения (рис. 2F). Вместе эти результаты предполагают, что HM0539 может защищать функцию кишечного барьера от повреждения, вызванного LPS или TNF-α.

Рисунок 2. Защитное действие HM0539 на барьерную функцию кишечника. (A – C) Монослои Caco-2 были предварительно обработаны различными концентрациями HM0539 (0–100 нг / мл), были обнаружены растворимый муцин (A) и покрытая муцином поверхность Caco-2 (B) . с помощью анализа PAS.Вестерн-блоттинг ( C , верхняя панель) и денситометрический анализ ( C , нижняя панель) экспрессии MUC2. (D – F) Монослои Caco-2 предварительно обрабатывали HM0539 или бензил-α-GalNAc (ингибитор муцина), затем стимулировали LPS (1 мкг / мл) или TNF-α (10 нг / мл) в течение 6 часов. (D) Вестерн-блот-анализ MUC2, ZO-1 и окклюдина, β-актин использовали в качестве контроля нагрузки. (E) Иммунофлуоресцентное окрашивание ZO-1. (F) TEER были обнаружены для оценки целостности кишечного барьера.Данные представлены как среднее ± стандартная ошибка среднего; P <0,05, ∗∗ P <0,01, ∗∗∗ P <0,001; NS, статистической значимости нет.

Лечение HM0539 снижает восприимчивость новорожденных крыс к инфекции E. coli K1 пероральным путем

Поскольку HM0539 обладает той же способностью усиливать муцин, что и LCS in vitro , мы затем определили, имеет ли HM0539 потенциал для защиты неонатальных крыс от E.coli K1 пероральным путем. Сначала мы исследовали роль HM0539 в созревании защиты кишечника новорожденных, как описано ранее (He et al., 2017). Новорожденным крысам вводили через зонд контрольный пектин / зеин или пектин / зеиновые шарики, содержащие HM0539, один раз в день в течение 3 дней без инфекции E. coli K1. Затем ткани толстой кишки всех крыс извлекали и использовали для иммуногистохимического анализа экспрессии Ki67, MUC2, ZO-1 и муцина. Мы обнаружили, что введение HM0539 может значительно усилить экспрессию этих молекул (Рисунки 3A – D), подразумевая, что HM0539 обладает потенциалом для ускорения созревания защиты кишечника новорожденных, как и LCS.Более того, анализ FITC-декстрана показал, что введение HM0539 может снизить кишечную проницаемость новорожденных крыс (рис. 3E). Наконец, мы определили, может ли HM0539 повышать устойчивость новорожденных крыс к E. coli K1, который является распространенной кишечной бактерией, вызывающей неонатальный сепсис и менингит через кишечную транслокацию. Новорожденным крысам вводили через зонд контрольный пектин / зеин или пектин / зеиновые шарики, содержащие HM0539, один раз в день в течение 3 дней с последующим внутрижелудочным введением 5 × 10 9 КОЕ E.coli K1. Как и ожидалось, введение HM0539 обеспечивает более высокую устойчивость новорожденных крыс к оральной инфекции E. coli K1, о чем свидетельствуют более низкие количества E. coli K1 в крови и CFS у мышей, обработанных HM0539, чем у мышей из контрольной группы ( Рисунок 3F). В совокупности эти результаты показали, что HM0539 достаточно для защиты новорожденных крыс от патогенеза E. coli K1.

Рис. 3. Влияние HM0539 на созревание кишечной защиты новорожденных крыс и кишечного происхождения E.coli K1-индуцированная инфекция. (A – D) Новорожденным крысам перорально вводили контрольный пектин / зеин или гранулы пектина / зеина, содержащие HM0539, в течение 3 дней, затем экстрагировали ткань толстой кишки для оценки защиты кишечника. Иммуногистохимическое окрашивание (левая панель) и полуколичественный анализ (правая панель) Ki67 (A) , MUC2 (B) и ZO-1 (C) среза толстой кишки. (D) PAS-окрашивание среза толстой кишки для оценки продукции муцина, правая панель показала PAS-положительные клетки на ворсинку. (E, F) Новорожденных крыс лечили, как описано выше, и через желудочный зонд кормили 5 × 10 9 КОЕ E. coli K1, кровь и спинномозговую жидкость собирали через 60 часов. Проницаемость кишечника оценивали с помощью анализа FITC-декстрана. (E) Относительный уровень FITC-декстрана в сыворотке. (F) Количество бактерий в крови и спинномозговой жидкости. Данные представлены как среднее ± стандартная ошибка среднего; P <0,05, ∗∗ P <0,01, ∗∗∗ P <0.001.

Лечение HM0539 защищает мышей от колита, индуцированного DSS

Учитывая, что HM0539 обладает потенциалом оказывать положительное влияние на функцию кишечного барьера, мы затем расширили его роль, чтобы предотвратить распространенное заболевание, связанное с дисфункцией кишечного барьера, включая колит и связанную с заболеванием печени бактериальную транслокацию и повреждение печени. Колит — типичное заболевание с нарушением целостности кишечника (Choksi et al., 2018). Здесь мы использовали модель DSS-индуцированного колита, хорошо зарекомендовавшую себя модель острого повреждения слизистой оболочки кишечника, для дальнейшего исследования защитного действия HM0539 на кишечник.Мышам вводили контрольный пектин / зеин или пектин / зеиновые гранулы, содержащие HM0539, как описано в разделе «Материалы и методы». Колит был вызван употреблением 3% воды DSS. Массу тела, длину толстой кишки, повреждение кишечника и экспрессию MUC2 и ZO-1 регистрировали, выявляли и анализировали для оценки степени тяжести колита. Мы обнаружили, что мыши с DSS-колитом потеряли больше веса после 5-7 дней лечения DSS, чем мыши HM0539 + DSS-колит (рис. 4A). Одновременно длина толстой кишки мышей с DSS-колитом также была значительно уменьшена по сравнению с таковой у мышей HM0539 + DSS-колит (Фигуры 4B, C).В соответствии с этими результатами мы наблюдали, что у мышей с DSS-колитом наблюдались заметные гистопатологические изменения в окрашенной HE толстой кишке с более серьезной потерей крипт и инфильтрацией лейкоцитов, чем у мышей HM0539 + DSS-колит (рис. 4D, нижняя панель). В соответствии с патологическими изменениями в толстой кишке, мы обнаружили, что обработка HM0539 восстанавливает вызванное DSS снижение уровней ZO-1 и MUC2 в кишечнике [Фигуры 4D (верхняя и средняя панели), E, ​​F]. Вместе эти результаты продемонстрировали, что HM0539 обладает профилактическим действием против колита, вызванного DSS.

Рисунок 4. Защитный эффект HM0539 при DSS-индуцированном колите. Мышей C57BL / 6 случайным образом делили на контрольную группу (CON), группу DSS-колита (DSS) и группу DSS-колита, обработанную HM0539 (HM0539 + DSS). Мышам вводили через желудочный зонд контрольный пектин / зеин или пектин / зеиновые шарики, содержащие HM0539, с 1 по 9 день. Колит DSS вызывали добавлением 3% DSS в питьевую воду с 3 по 9 день. Всех мышей умерщвляли на 12 день. оценивали тяжесть колита и дисфункцию кишечника. (A) Масса тела мышей от 1 до 7 дней после обработки DSS. (B, C) Длина толстой кишки мышей на 12 день. Иммуногистохимическое окрашивание и полуколичественный анализ MUC2 ( D , верхняя панель, E ) и ZO-1 ( D , средняя панель, F ) отдела толстой кишки. ( D , нижняя панель) Окрашивание среза толстой кишки HE. Данные представлены как среднее ± стандартная ошибка среднего; ∗∗ P <0,01, ∗∗∗ P <0,001.

Лечение HM0539 предотвращает индуцированную LPS / GalN дисфункцию кишечного барьера, бактериальную транслокацию и повреждение печени

Затем мы определили, может ли HM0539 оказывать защитное действие против индуцированной LPS / GalN дисфункции кишечного барьера, бактериальной транслокации и повреждения печени. Мышам C57BL / 6 внутрижелудочно вводили пектин / зеиновый контроль или пектин / зеиновые шарики, содержащие HM0539, в течение 7 дней с последующей внутрибрюшинной инъекцией LPS и GalN.Ткани толстой кишки и печени были извлечены через 24 часа для иммуногистохимического анализа и окрашивания HE соответственно. Мы обнаружили, что стимуляция мышей LPS / GalN снижала кишечную экспрессию MUC2 и ZO-1 [Фиг.5A (верхняя и средняя панели), B, C], а также усиливала кишечную проницаемость (Рисунок 5D). Напротив, введение HM0539 восстановило эти параметры. Соответственно, бактериальная транслокация в печень и MNL также значительно ингибировалась в группе, обработанной HM0539, по сравнению с группой LPS / GalN (Таблица 3).Эти данные показали, что HM0539 может предотвращать индуцированную LPS / GalN дисфункцию кишечного барьера и транслокацию бактерий.

Фигура 5. Защитный эффект HM0539 на LPS-GalN-индуцированную дисфункцию кишечного барьера, бактериальную транслокацию и повреждение печени. Мышей C57BL / 6 случайным образом распределяли на контрольную группу (CON), группу LPS / GalN (LPS / GalN) и группу LPS / GalN, обработанную HM0539 (HM0539 + LPS / GalN). Мышам через желудочный зонд вводили контрольный пектин / зеин или гранулы пектин / зеин, содержащие HM0539, в течение 7 дней.Затем мышам внутрибрюшинно вводили физиологический раствор или LPS и GalN. Через 24 часа всех мышей умерщвляли. Оценивались бактериальная транслокация, дисфункция кишечного барьера и повреждение печени. Иммуногистохимическое окрашивание и полуколичественный анализ MUC2 ( A , верхняя панель, B ) и ZO-1 ( A , средняя панель, C ) среза толстой кишки. Проницаемость кишечника оценивали с использованием анализа FITC-декстрана. ( A , нижняя панель) Окрашивание среза печени HE. (D) Относительный уровень FITC-декстрана в сыворотке. (E, F) Анализ AST и ALT гомогената печени. (G, H) ELISA-анализ TNF-α и IL-6 в гомогенате печени. Данные представлены как среднее ± стандартная ошибка среднего; P <0,05, ∗∗ P <0,01, ∗∗∗ P <0,001.

Таблица 3. Количество бактерий в печени и гомогенате MLN.

Наконец, мы исследовали, может ли HM0539 предотвращать LPS / GalN-индуцированное повреждение печени.Окрашивание среза печени HE показало, что LPS / GalN вызывает значительное повреждение печени по сравнению с контрольной группой (рис. 5A нижняя панель), включая кровотечение, микроабсцессы и обширную инфильтрацию макрофагов и нейтрофилов. Напротив, мыши, получавшие HM0539, имели нормальную гистологию. Более того, сывороточные уровни AST и ALT значительно снизились в группе HM0539 + LPS / GalN по сравнению с таковыми в группе LPS / GalN, подтверждая, что HM0539 может предотвратить повреждение печени, вызванное LPS / DalN (Фигуры 5E, F).Более того, мы отметили, что обработка HM0539 ослабляла LPS / DalN-индуцированную секрецию провоспалительных цитокинов TNF-α и IL-6 в гомогенате печени (Фигуры 5G, H), что указывает на то, что HM0539 также проявляет противовоспалительное свойство в контексте повреждения печени. В целом эти данные позволяют предположить, что HM0539 полезен для предотвращения индуцированной LPS / GalN дисфункции кишечного барьера, транслокации бактерий и повреждения печени.

Обсуждение

Постбиотики недавно получили медицинскую помощь из-за их потенциального благотворного воздействия на здоровье хозяина.Здесь мы идентифицировали и охарактеризовали новый постбиотик, названный HM0539, из культурального супернатанта LGG. Мы обнаружили, что этот постбиотик может защищать эпителий кишечника от повреждений, вызванных LPS или TNF-α. Дальнейшие исследования in vivo продемонстрировали, что HM0539 может предотвращать не только DSS-индуцированный колит, но также вызванную LPS / GalN дисфункцию кишечного барьера, транслокацию бактерий и повреждение печени. Наше исследование дает новое понимание механизма действия пробиотиков и новую идею для профилактики и лечения заболеваний, связанных с дисфункцией кишечного барьера.

Escherichia coli , снабженная капсулой K1, может пересекать кишечный барьер и гематоэнцефалический барьер, вызывая неонатальный сепсис и менингит (Coureuil et al., 2017). Кишечная колонизация и транслокация E. coli K1 имеют решающее значение для его распространения в кровотоке и возможной системной инфекции и менингита (Croxen and Finlay, 2010; He et al., 2017; Zeng et al., 2017). Новорожденные, особенно недоношенные и дети с очень низкой массой тела при рождении, восприимчивы к E.coli K1 из-за их незрелой защиты кишечного барьера (Croxen and Finlay, 2010; Birchenough et al., 2013; Birchenough et al., 2017; He et al., 2017; Zeng et al., 2017). В нашем предыдущем исследовании было показано, что лечение LCS повышает устойчивость новорожденных крыс к оральной инфекции E. coli K1, способствуя созреванию неонатальной защиты кишечника. Однако точный компонент LCS, который оказывает это усиление барьера и защищает от болезней, остается неизвестным.В этом исследовании мы обнаружили, что HM0539, белок, секретируемый LCS, идентифицированный с помощью LC-MS / MS, был достаточным для ускорения созревания кишечной защиты новорожденных и защиты их от инфекции E. coli K1 пероральным путем. Эти данные приводят нас к выводу, что HM0539 является биоактивным компонентом супернатанта культуры LGG, а также поддерживают теорию введения продуктов, полученных из пробиотиков, для замены живых пробиотиков, чтобы избежать потенциальных рисков в определенных условиях. Для особых групп населения, таких как недоношенные дети, дети с низкой массой тела при рождении, пациенты с ослабленным иммунитетом и т. Д., введение пробиотиков необходимо проводить очень осторожно, поскольку сообщалось, что многие пробиотики, включая LGG, вызывают бактериемию и сепсис (Brecht et al., 2016; Dani et al., 2016). В нашем исследовании открытие того, что белок, полученный из пробиотиков, может оказывать мощный защитный эффект, дает новые идеи для поддержания здоровья в особых группах населения.

Интересным открытием здесь является то, что мы не обнаружили p40 в супернатанте культуры LGG. Фактически, p40 и p75 были двумя наиболее распространенными белками, очищенными из супернатанта культуры LGG ранее Yan et al.(2007). Последующие исследования показали, что p40 может ингибировать цитокин-индуцированный апоптоз кишечного эпителия, усиливает выработку кишечного муцина и IgA и сохраняет барьерную функцию кишечника (Yan et al., 2007, 2013; Yan and Polk, 2012; Wang et al., 2014, 2017) . Хотя и p40, и p75 обладают потенциалом модулировать гомеостаз кишечника, p40 оказывает более сильные эффекты, чем p75 (Yan and Polk, 2012). Здесь мы идентифицировали по крайней мере 58 белков из LCS, среди которых, однако, HM0539, но ни p40, ни p75, не был самым распространенным.Этот результат согласуется с предыдущим исследованием, опубликованным Sánchez et al. (2009), в котором также нет следов р40. Удивительно, но в этом исследовании самым распространенным белком является p75, но не HM0539. Эти противоречивые результаты, полученные Яном, Санчесом и нашей собственной группой, могут быть связаны с различными процедурами приготовления супернатанта культуры LGG, поскольку разные условия культивирования могут влиять на белок секреции LGG (Koskenniemi et al., 2009). Хотя он отличается от p40 и p75, HM0539 также обладает потенциалом защиты кишечного барьера.Таким образом, мы заключаем, что HM0539 является новым постбиотиком LGG. В настоящее время проводятся исследования по сравнению функции между p40 и HM0539.

Поскольку HM0539 играет особую роль в защите кишечного барьера, мы далее исследуем его терапевтический потенциал, используя две модели заболеваний, обычно связанных с дисфункцией кишечного барьера. Первой моделью, которую мы использовали, был колит, вызванный DSS, который является одной из наиболее часто используемых моделей колита на животных для разработки и оценки потенциальных терапевтических стратегий (Kraus and Arber, 2009).Механизм, с помощью которого DSS вызывает повреждение слизистой оболочки толстой кишки, остается неясным, но недавние исследования продемонстрировали, что сульфатные группы молекул DSS разрушают слой слизи кишечника и делают кишечный барьер более проницаемым для антигенов (Eichele and Kharbanda, 2017). Фактически, пагубное влияние DSS на барьерную функцию кишечника было обнаружено уже после 4–12 часов стимуляции. Однако на данный момент нет значимых клинических симптомов колита (Petersson et al., 2010).Кроме того, Sharma et al. (2018) показали, что потеря целостности эпителия предшествует явному воспалению и повреждению кишечника. Эти исследования продемонстрировали, что нарушение функции кишечного барьера может быть причиной колита, поэтому защита целостности кишечника с помощью HM0539 может улучшить общее заболевание.

Вторая модель, которую мы использовали, была LPS-GalN-индуцированной острой печеночной недостаточностью. Хотя существует множество доказательств того, что GalN непосредственно вызывает повреждение печени, исследования показали, что бактерии и его продукты, такие как эндотоксин, являются ключевыми факторами патогенеза этого повреждения печени (Ewaschuk et al., 2007). При печеночной недостаточности нарушается целостность кишечника, что приводит к перемещению бактерий и их продуктов в системный кровоток. Было четко показано, что GalN-индуцированная транслокация кишечных бактерий / эндотоксинов индуцирует активацию клеток Купфера и высвобождение TNF-α, что в конечном итоге приводит к тяжелой печеночной недостаточности (Morita et al., 2004). Кроме того, было обнаружено, что моноклональные антитела к эндотоксину и удаление бактерий из кишечника (например, лечение антибиотиками или колэктомия) блокируют GalN-индуцированное повреждение печени (Morita et al., 2004). Таким образом, как и в модели DSS-колита, дисфункция кишечного барьера также является критическим триггером воспаления в модели LPS / GalN. Этот сценарий может объяснить, почему HM0539 может облегчить повреждение печени в этой модели печеночной недостаточности. Взятые вместе, эти результаты позволяют предположить, что HM0539 имеет не только большой потенциал в предотвращении дисфункции кишечного барьера, но также является эффективной профилактикой заболеваний, связанных с дисфункцией кишечного барьера. Для выяснения положительного механизма действия HM0539 необходимы дальнейшие исследования.

Ограничение, на которое здесь следует обратить внимание, — это непонятное понимание полезной роли HM0539 на барьерную функцию кишечника. Как обсуждалось выше, HM0539 достиг своего защитного действия от болезней, главным образом, за счет усиления функции физического барьера кишечника, такой как слой слизи, экспрессия TJ и целостность кишечника. Однако иммунная система кишечника и микробиота кишечника также являются важными составляющими барьерной функции кишечника (Maloy and Powrie, 2011; Deshmukh et al., 2014; Lv et al., 2014). Фактически, микробиота кишечника, иммунная система кишечника и физический барьер кишечника комплексно взаимодействуют друг с другом, чтобы поддерживать гомеостаз кишечника. Нарушение или изменение одного из них может привести к изменению других аспектов (Peterson, Artis, 2014). Например, слизь может образовывать особую структуру для поддержания высоких концентраций антимикробных молекул (дефенсинов и секреторного IgA) вблизи эпителиального слоя кишечника, что имеет решающее значение для поддержания микробиоты кишечника (Maloy and Powrie, 2011).В свою очередь, микробиота также может влиять на гликозилирование муцина O кишечника MUC2 (Arike et al., 2017). Слизь и муцины бокаловидных клеток и энтероцитов могут взаимодействовать с иммунной системой кишечника и модулировать ее (Pelaseyed et al., 2014). Клетки кишечного эпителия, основная часть физического барьера кишечника, всегда функционируют как посредник кишечного гомеостаза, высвобождая факторы, влияющие на колонизацию микробов, обнаруживая как полезные, так и вредные микробы, и регулируя иммунные реакции кишечника (Maloy and Powrie, 2011).Таким образом, взаимосвязь между физическим барьером кишечника, иммунной системой кишечника и микробиомом кишечника является взаимовыгодной. Учитывая, что HM0539 оказывает сильное положительное влияние на физический барьер кишечника, мы полагаем, что он также имеет большой потенциал в модуляции иммунной системы кишечника и микробиоты кишечника.

Таким образом, мы идентифицировали и очистили новый растворимый в LGG белок, названный HM0539, и охарактеризовали его защитную функцию кишечного барьера в отношении стимуляции секреции муцина и экспрессии белка TJ и снижения проницаемости кишечника.Кроме того, мы исследовали его терапевтический потенциал, представив две модели, связанные с дисфункцией барьера: DSS-индуцированный колит и LPS-GalN-индуцированная острая печеночная недостаточность. Эти результаты подтверждают потенциально широкое применение HM0539 при заболеваниях, связанных с дисфункцией кишечного барьера, в то время как точный механизм требует дальнейшего изучения.

Авторские взносы

HC, S-HH, JG, XH, YL и YuW разработали и разработали эксперименты. JG, YL, YuW, TH, LL, ZG, QZ, SY, YiW, WY и ZZ проводили эксперименты.JG, ZG, LL, WY, SY, YuW и HC проанализировали данные. S-HH предоставила реагенты, материалы и инструменты для анализа. JG, HC, YuW, YL и TH участвовали в его разработке и координации, а также помогли составить черновик рукописи. Все авторы прочитали и одобрили окончательную рукопись.

Финансирование

Этот проект получил финансовую поддержку Национального научного фонда молодых ученых Китая (№ 81801985), Китайского фонда постдокторантуры (№ 2018M633076) и Программы бакалавриата по инновациям и предпринимательству провинции Гуандун в Китае (№201612121071).

Заявление о конфликте интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось в отсутствие каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могут быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Дополнительные материалы

Дополнительные материалы к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fmicb.2019.00477/full#supplementary-material

РИСУНОК S1 | Биоинформатический анализ и очистка HM0539. (A) Выравнивания аминокислотных последовательностей между HM0539, гидролазой и ранее идентифицированными p40 и p75. Последовательности идентифицировали с помощью поиска BLAST и выравнивали с помощью программы DNAMAN. (B) Присутствие и расположение сайтов расщепления сигнального пептида в HM0539 было предсказано с использованием SignalP 4.1 Server. (C) Прогнозирование трансмембранной спирали (спиралей) HM0539 выполняли с использованием TMHMM Server 2.0. (D) HM0539 рекомбинировали и очищали с использованием системы His-tag / Ni-NTA.Дорожка 2: клеточные лизаты; Дорожки: 3–5: элюированный HM0539.

РИСУНОК S2 | Генетическая карта локусов, необходимых для секреции HM0539. Точное расположение HM0539 в генетическом локусе показано сплошной черной стрелкой. Места и направления транскрипции генов представлены стрелками, а соответствующие названия белков показаны над или под ними. Шкала (в килобазах) показана внизу.

РИСУНОК S3 | Аминокислотное выравнивание HM0539 и его гомологичного белка из штамма Lactobacillus rhamnosus ATCC 21052, Lactobacillus rhamnosus, , штамм NCTC13764, Lactobacillus rhamnosus, штамм , LR-B1, Lactobacillus 9013, штамм LR-B1, , Lactobacillus Rhamnosus , штамм LR-B1, casei , штамм LC5, Lactobacillus casei ATCC 393.

ТАБЛИЦА S1 | Полноразмерная кодирующая ДНК белка HM0539.

ТАБЛИЦА S2 | Результаты сравнения аминокислотных последовательностей 19 наиболее согласованных гомологичных белков с HM0539.

Сноски

  1. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/Genbank/index.html

Список литературы

Агилар-Тоала, Дж., Гарсия-Варела, Р., Гарсиа, Х., Мата-Аро, В., Гонсалес-Кордова, А., Вальехо-Кордова, Б. и др. (2018). Постбиотики: развивающийся термин в области функциональных продуктов питания. Trends Food Sci. Technol. 75, 105–114. DOI: 10.1016 / j.tifs.2018.03.009

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Арике, Л., Хольмен-Ларссон, Дж., И Ханссон, Г. К. (2017). На О-гликозилирование муцина Muc2 кишечника влияет микробиота и регулируется дифференциальной экспрессией гликозилтранфераз. Гликобиология 27, 318–328. DOI: 10.1093 / glycob / cww134

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ассимакопулос, С.Ф., Триантос, К., Марулис, И., и Гогос, К. (2018). Роль барьерной функции кишечника в здоровье и болезнях. Гастроэнтерол. Res. 11, 261–263. DOI: 10.14740 / gr1053w

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Biagioli, M., Capobianco, D., Carino, A., Marchianò, S., Fiorucci, C., Ricci, P., et al. (2018). Дивергентная эффективность многовидовых пробиотических препаратов на структуру кишечной микробиоты зависит от метаболических свойств. Фронт.Microbiol. 9: 2669. DOI: 10.3390 / nu11020325

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Бирчено, Г. М., Далгакиран, Ф., Виткомб, Л. А., Йоханссон, М. Э., Маккарти, А. Дж., Ханссон, Г. К. и др. (2017). Постнатальное развитие слизистой оболочки тонкой кишки определяет возрастную региоселективную восприимчивость к инфекции Escherichia coli K1. Sci. Реп. 7:83. DOI: 10.1038 / s41598-017-00123-w

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Бирчено, Г.M., Johansson, M.E., Stabler, R.A., Dalgakiran, F., Hansson, G.C., Wren, B.W. и др. (2013). Нарушены врожденные защитные механизмы желудочно-кишечного тракта новорожденных в ответ на колонизацию нейропатогенной Escherichia coli . Заражение. Иммун. 81, 3264–3275. DOI: 10.1128 / IAI.00268-13

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Брехт, М., Гарг, А., Лонгстафф, К., Купер, К., и Андерсен, К. (2016). Lactobacillus sepsis после лапаротомии у недоношенного ребенка: предостережение. Неонатология 109, 186–189. DOI: 10.1159 / 000441965

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Bron, P.A., Kleerebezem, M., Brummer, R.-J., Cani, P.D., Mercenier, A., Macdonald, T. T., et al. (2017). Могут ли пробиотики модулировать заболевание человека, влияя на барьерную функцию кишечника? Br. J. Nutr. 117, 93–107. DOI: 10.1017 / S0007114516004037

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Чокси, Ю.А., Редди В. К., Сингх К., Барретт К. В., Шорт С. П., Паранг Б. и др. (2018). BVES требуется для поддержания целостности эпителия толстой кишки при экспериментальном колите путем изменения кишечной проницаемости. Mucosal Immunol. 5, 1363–1374. DOI: 10.1038 / s41385-018-0043-2

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Cicenia, A., Scirocco, A., Carabotti, M., Pallotta, L., Marignani, M., and Severi, C. (2014). Постбиотическая активность факторов, производных лактобацилл. J. Clin. Гастроэнтерол. 48, S18 – S22. DOI: 10.1097 / MCG.0000000000000231

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Coureuil, M., Lécuyer, H., Bourdoulous, S., and Nassif, X. (2017). Путешествие в мозг: понимание того, как бактериальные патогены проникают через гематоэнцефалический барьер. Nat. Rev. Microbiol. 15, 149–159. DOI: 10.1038 / nrmicro.2016.178

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Дэни, К., Ковьелло, К., Корсини, И., Арена, Ф., Антонелли, А., Россолини, Г. М. (2016). Lactobacillus sepsis и пробиотическая терапия у новорожденных: два новых случая и обзор литературы. Am. J. Perinatol. Rep. 6, e25 – e29. DOI: 10.1055 / с-0035-1566312

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Deshmukh, H. S., Liu, Y., Menkiti, O. R., Mei, J., Dai, N., O’leary, C.E., et al. (2014). Микробиота регулирует гомеостаз нейтрофилов и устойчивость хозяина к сепсису Escherichia coli K1 у новорожденных мышей. Nat. Med. 20, 524–530. DOI: 10,1038 / нм. 3542

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Донато, К. А., Гаро, М. Г., Ван, Ю. Дж. Дж., И Шерман, П. М. (2010). Lactobacillus rhamnosus GG ослабляет индуцированную интерфероном-γ и фактором некроза опухоли-α дисфункцию барьера и провоспалительную передачу сигналов. Микробиология 156, 3288–3297. DOI: 10.1099 / mic.0.040139-0

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Эйхеле, Д.Д., Харбанда К. К. (2017). Модель колита с декстраном сульфатом натрия на мышах: незаменимый инструмент для улучшения нашего понимания патогенеза воспалительных заболеваний кишечника. World J. Gastroenterol. 23, 6016–6029. DOI: 10.3748 / wjg.v23.i33.6016

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ewaschuk, J., Endersby, R., Thiel, D., Diaz, H., Backer, J., Ma, M., et al. (2007). Пробиотические бактерии предотвращают повреждение печени и поддерживают функцию барьера толстой кишки на мышиной модели сепсиса. Гепатология 46, 841–850. DOI: 10.1002 / hep.21750

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

ФАО и ВОЗ (2001). Здоровые и питательные свойства пробиотиков в пищевых продуктах, включая сухое молоко с живыми молочнокислыми бактериями. Antergia: ФАО / ВОЗ, 1–34.

Харб, Х., Ван Тол, Э., Хейне, Х., Брааксма, М., Гросс, Г., Оверкамп, К. и др. (2013). Неонатальный прием обработанного супернатанта из Lactobacillus rhamnosus GG улучшает аллергическое воспаление дыхательных путей у мышей в более позднем возрасте. Clin. Exp. Аллергия 43, 353–364. DOI: 10.1111 / cea.12047

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хе Х., Цзэн К., Путиякуннон С., Цзэн З., Янг В., Цю Дж. И др. (2017). Lactobacillus rhamnosus GG супернатант повышает устойчивость новорожденных к системной инфекции Escherichia coli K1 за счет ускорения развития защиты кишечника. Sci. Отчет 7: 43305. DOI: 10.1038 / srep43305

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хилл, Д., Сугрю, И., Тобин, К., Хилл, К., Стэнтон, К., и Росс, Р. П. (2018). Группа Lactobacillus casei : история и приложения, связанные со здоровьем. Фронт. Microbiol. 9: 2107. DOI: 10.3389 / fmicb.2018.02107

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Катаяма, Х., Нагасу, Т., и Ода, Ю. (2001). Улучшение протокола расщепления в геле для снятия отпечатков пептидных масс с помощью матричной лазерной десорбции / ионизации времяпролетной масс-спектрометрии. Rapid Commun. Масс-спектрометрия. 15, 1416–1421. DOI: 10.1002 / RCM.379

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Кениг, Дж., Уэллс, Дж., Кани, П. Д., Гарсия-Роденас, К. Л., Макдональд, Т., Мерсенье, А. и др. (2016). Функция кишечного барьера человека при здоровье и болезни. Clin. Пер. Гастроэнтерол. 7: e196. DOI: 10.1038 / ctg.2016.54

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Кониси, Х., Фудзияма, М., Танака, Х., Уэно, Н., Мориичи, К., Сасадзима, Дж. И др. (2016). Феррихром, полученный из пробиотиков, подавляет прогрессирование рака толстой кишки через JNK-опосредованный апоптоз. Nat. Commun. 7: 12365. DOI: 10.1038 / ncomms12365

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Koskenniemi, K., Koponen, J., Kankainen, M., Savijoki, K., Tynkkynen, S., De Vos, W. M., et al. (2009). Протеомный анализ Lactobacillus rhamnosus GG с использованием 2-D DIGE и масс-спектрометрии показывает дифференцированное производство белка в лабораторных и промышленных средах для выращивания. J. Proteome Res. 8, 4993–5007. DOI: 10.1021 / pr

23

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Лебеер, С., Брон, П. А., Марко, М. Л., Ван Пийкерен, Ж.-П., Мазервэй, М. О. К., Хилл, К. и др. (2018). Идентификация пробиотических эффекторных молекул: настоящее состояние и перспективы на будущее. Curr. Мнение. Biotechnol. 49, 217–223. DOI: 10.1016 / j.copbio.2017.10.007

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Лопетузо, Л.Р., Скальдаферри, Ф., Бруно, Г., Петито, В., Франчески, Ф., и Гасбаррини, А. (2015). Терапевтическое управление утечкой кишечного барьера: возрастающая роль защитных барьеров слизистой оболочки. Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci. 19, 1068–1076.

PubMed Аннотация | Google Scholar

Lv, L.-X., Hu, X.-J., Qian, G.-R., Zhang, H., Lu, H.-F., Zheng, B.-W., et al. (2014). Введение Lactobacillus salivarius LI01 или Pediococcus pentosaceus LI05 улучшает острое повреждение печени, вызванное D-галактозамином у крыс. Заявл. Microbiol. Biotechnol. 98, 5619–5632. DOI: 10.1007 / s00253-014-5638-2

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Мак, Д. Р., Майкл, С., Вей, С., Макдугалл, Л., и Холлингсворт, М. А. (1999). Пробиотики подавляют энтеропатогенную приверженность E. coli in vitro, индуцируя экспрессию гена кишечного муцина. Am. J. Physiol. 276, G941 – G950. DOI: 10.1152 / ajpgi.1999.276.4.G941

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Марчези, Дж.Р., Адамс, Д. Х., Фава, Ф., Гермес, Г. Д., Хиршфилд, Г. М., Холд, Г. и др. (2016). Микробиота кишечника и здоровье хозяина: новый клинический рубеж. Кишечник 65, 330–339. DOI: 10.1136 / gutjnl-2015-309990

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Мартенс, Э. К., Нойман, М., Десаи, М. С. (2018). Взаимодействие комменсалов и патогенных микроорганизмов со слизистой оболочкой кишечника. Nat. Rev. Microbiol. 16, 457–470. DOI: 10.1038 / s41579-018-0036-x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Мартин, Р., Laval, L., Chain, F., Miquel, S., Natividad, J., Cherbuy, C., et al. (2016). Bifidobacterium animalis ssp. lactis CNCM-I2494 восстанавливает проницаемость кишечного барьера у мышей с хроническим легким воспалением. Фронт. Microbiol. 7: 608. DOI: 10.3389 / fmicb.2016.00608

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Морита Т., Танабэ Х., Такахаши К. и Сугияма К. (2004). Прием резистентного крахмала защищает от притока эндотоксина из кишечного тракта и уменьшает повреждение печени у крыс, вызванное D-галактозамином. J. Gastroenterol. Гепатол. 19, 303–313. DOI: 10.1111 / j.1440-1746.2003.03208.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Орландо, А., Линсалата, М., Нотарникола, М., Тутино, В.

Список компаний по производству рыбной еды в Аргентине

  • Корпорация Пемор

    Мы торгуем из Аргентины. и мы можем предложить вам морепродукты, рыбные консервы, рыбий жир, масло кальмаров, рыбную муку и др.

    Адрес : Ареналес 1849 4-й этаж Буэнос-Айрес, Буэнос-Айрес Тип бизнеса : Торговая компания

  • JAG INT, ТРЕЙДЕРЫ

    Наша компания имеет более чем 15-летний опыт продаж агентов, рыбы, моллюсков, свежих и замороженных продуктов, а также сырья для пищевой, пищевой и фармакологической промышленности.Расположен в главном рыбацком порту Мар-дель-Плата в Аргентине …

    Адрес : Аргентина Вид деятельности : Торговля

  • BIMO торговля

    Адрес : ANDRADE 1159 Тип деятельности : Агент, дистрибьютор / оптовик

  • Южная граница

    Расположенный в Мар-дель-Плата, Аргентина, South Frontier работает агентом по закупкам для иностранных компаний по всему миру, тесно сотрудничая с производителями продуктов питания.Мы специализируемся на сельском хозяйстве, агропромышленном производстве морепродуктов. …

    Адрес : 12 октября 3223 5ºA Мар-дель-Плата, Буэнос-Айрес Тип предприятия : Торговая компания

  • Магазин Pampa

    Адрес : 450 Rosario Vera Penaloza suite 604a Тип бизнеса : Производитель, Торговая Компания

  • SANTA SARA КОРМА ДЛЯ ЖИВОТНЫХ

    Адрес : Corrientes Avenue 456 1-й этаж Офис 11 Тип бизнеса : Производитель, Торговая Компания, Дистрибьютор / Оптовая торговля

  • S&S BROKERS

    Изначально наш бизнес был сосредоточен на торговле рыбной мукой между Аргентиной и Китаем Тайвань.Позже расширилась, расширившись на новые рынки, добавив такие продукты, как замороженная рыба, рыбий жир, сухая сыворотка, сахарный корм для домашних животных. …

    Адрес : Bulnes 2737 Вид деятельности : Торговая компания

  • CBD Oil Преимущества, побочные эффекты, взаимодействие с лекарствами [2020]

    Даже по мере того, как знания о лекарственной ценности марихуаны распространяются по всему миру, все больше и больше штатов США легализуют ее использование. И вместе с этим продукт под названием масло CBD также набирает популярность в качестве терапевтического препарата для естественного лечения таких проблем со здоровьем, как беспокойство, бессонница и даже рак.

    Итак, прежде чем мы подробно объясним преимущества масла CBD, давайте сначала разберемся, что такое CBD на самом деле.

    Несмотря на то, что знания о лекарственной ценности марихуаны распространяются по всему миру, все больше и больше штатов США легализуют ее использование. И вместе с этим продукт под названием масло CBD также набирает популярность в качестве терапевтического препарата для естественного лечения таких проблем со здоровьем, как беспокойство, бессонница и даже рак.

    Итак, прежде чем мы подробно объясним преимущества масла CBD, давайте сначала разберемся, что такое CBD на самом деле.

    Что такое масло CBD?

    CBD или каннабидиол — одно из 104 химических соединений, известных как каннабиноиды, обнаруженных в растении каннабис, которое принадлежит к разновидностям Cannabis sativa. CBD — это не опьяняющий компонент растения, и считается, что он оказывает множество терапевтических эффектов на человеческое тело и разум.

    Поскольку CBD не является психоактивным компонентом, масло CBD не вызывает «кайфа» или ощущения эйфории, которое обычно ассоциируется с каннабисом или марихуаной. В масле CBD нет или незначительные следы ТГК (тетрагидроканнабинола — еще одно соединение, содержащееся в растении), который действительно является психоактивным каннабиноидом и ответственен за знаменитый кайф от марихуаны.

    Каннабидиол извлекается из каннабиса или конопли (растения, принадлежащие к семейству Cannabis Sativa) и разбавляется маслом-носителем, таким как кокосовое масло или масло семян конопли, для создания масла CBD. Из-за разногласий вокруг растения каннабис, CBD промышленного класса извлекается из конопли (другого растения, которое относится к видам Cannabis Sativa), так как в нем менее 0,3% THC.

    Производители продают масла CBD в различных формах — настойка, концентрат, мягкие гелевые капсулы, раствор для местного применения, спреи для под язык, воск, пищевые продукты, кремы для кожи и пластыри.Концентрация CBD в каждом из этих продуктов может варьироваться.

    Хотя несколько исследований продемонстрировали преимущества масла CBD для пациентов, страдающих эпилепсией, проблемами беспокойства, проблемами с сердцем, шизофренией, воспалением, хронической болью и зависимостью, исследования все еще продолжаются, и ученые не совсем уверены в точном уровне эффективности масла CBD в лечение этих недугов.

    Преимущества масла CBD:

    Доказано, что каннабидиол является хорошим средством от многих заболеваний.Прежде чем мы более подробно обсудим преимущества масла CBD для человеческого тела и разума, мы должны добавить, что использование масла CBD в любой форме довольно безопасно, поскольку не приводит к зависимости или толерантности к препарату. Таким образом, это отличный выбор для тех, кто пытается избавиться от зависимости или не употреблять наркотики. До сих пор сообщалось, что масло CBD помогает при:

    1. Облегчение хронической боли и воспаления

    Люди, страдающие от хронической боли, вызванной фибромиалгией, испытали облегчение после использования масла CBD.Также было обнаружено, что использование масла CBD обеспечивает общее обезболивание и предотвращает дегенерацию нервной системы.

    В Канаде одобрен для лечения рассеянного склероза и боли при раке. По словам авторов исследования, опубликованного в Журнале экспериментальной медицины, CBD значительно уменьшил хроническое воспаление и боль у некоторых мышей и крыс. Исследователи предположили, что CBD может обеспечить новое лечение хронической боли.

    Хроническое воспаление, по данным Национального центра биотехнологической информации, приводит ко многим неинфекционным заболеваниям, таким как болезни сердца, рак, болезнь Альцгеймера, диабет 1 типа и даже аутоиммунные заболевания.Исследования показывают, что CBD может лечить боль и, в свою очередь, облегчать эти заболевания.

    2. Успокаивающая эпилепсия

    Доказано, что CBD обладает противосудорожными свойствами, которые могут успешно лечить детей с лекарственно-устойчивыми типами неврологических расстройств, таких как эпилепсия.

    В исследовании, опубликованном в Медицинском журнале Новой Англии, CBD показал снижение частоты приступов на 23 процентных пункта по сравнению с теми, кто принимал плацебо.

    Фактически, в июне 2018 года советники Управления по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США (FDA) одобрили рецептурное использование Epidiolex, очищенной формы масла CBD, для лечения двух редких и тяжелых форм эпилепсии у пациентов в возрасте от 2 лет. и старше.Эти две формы эпилепсии — синдром Леннокса-Гасто (LGS) и синдром Драве (DS) — обычно не поддаются лечению противосудорожными препаратами.

    Epidiolex оказался первым одобренным FDA препаратом, который содержит очищенную форму препарата, полученного из марихуаны. Этот препарат уменьшает судороги, а иногда и вовсе купирует их. Замечательные визуальные доказательства его воздействия на детей, страдающих «детской эпилепсией», доступны в Интернете для просмотра.

    25 июня Dr.Скотт Готтлиб от имени FDA заявил: «Сегодня FDA одобрило очищенную форму лекарственного препарата каннабидиол (CBD)… Новый продукт был одобрен для лечения припадков, связанных с двумя редкими тяжелыми формами эпилепсии, у пациентов с двухлетним заболеванием. возраст и старше ».

    Исследования также показали, что CBD может помочь в лечении осложнений, связанных с эпилепсией, таких как нейродегенерация, повреждение нейронов и психические заболевания.

    3. Беспокойство и депрессия

    По данным Американской ассоциации тревожности и депрессии, депрессия поражает 6% населения США, а тревога — 18% населения США.Их исследования показывают, что масло CBD может помочь с обеими проблемами.

    В то время как врачи обычно советуют людям, страдающим хронической тревогой, избегать каннабиса, поскольку даже следы THC могут вызывать или усиливать тревогу и паранойю, авторы обзора, опубликованного в журнале Neurotherapeutics в 2015 году, пришли к выводу, что CBD, непсихоактивное соединение, может действительно помогает снизить тревожность у людей с определенными поведенческими расстройствами, связанными с тревогой, такими как: —

    • Посттравматическое стрессовое расстройство (ПТСР)
    • Общее тревожное расстройство
    • Паническое расстройство
    • Социальное тревожное расстройство
    • Обсессивно-компульсивное расстройство ( ОКР)
    • Расстройства, связанные со злоупотреблением психоактивными веществами

    Однако эти выводы были получены в результате экспериментальных исследований, клинических испытаний и эпидемиологических исследований, и на данный момент исследования на людях отсутствуют.

    CBD также снижает стресс и дискомфорт, связанный с публичными выступлениями.

    Что касается депрессии, то было замечено, что CBD снижает депрессию за счет усиления как серотонинергических, так и глутаматных сигналов коры головного мозга (оба из которых отсутствуют у людей, страдающих депрессией).

    4. Снижение окислительного стресса

    Окислительный стресс — это состояние, при котором в организме слишком много свободных радикалов, и антиоксиданты не могут нейтрализовать их все. В наши дни эта проблема возникла сравнительно недавно из-за растущей токсичности в нашей окружающей среде.

    Два отдельных исследования показали, что масло CBD обладает антиоксидантными и нейропротекторными свойствами, которые помогают уменьшить неврологические повреждения, вызванные свободными радикалами.

    5. Помощь при лечении сердечных заболеваний

    Сердечные заболевания также являются растущей проблемой во всем мире. Фактически, это одна из основных причин смерти в Соединенных Штатах. Здоровая диета и образ жизни — главный приоритет для таких людей, но масло CBD также может помочь.

    В небольшом исследовании, опубликованном в JCI Insight в 2017 году, исследователи отметили, что CBD может помочь предотвратить колебания артериального давления из-за стресса.В этом исследовании девяти здоровым добровольцам-мужчинам была дана однократная доза CBD или плацебо. У тех, кто получал CBD, было более низкое кровяное давление по сравнению с теми, кто получал плацебо, как до, так и после стрессового события.

    По словам исследователей, каннабидиол помогает:

    • Уменьшает закупорку артерий
    • Уменьшает вызванную стрессом сердечно-сосудистую реакцию
    • Снижает кровяное давление
    • Снижает уровень холестерина

    Масло CBD помогает предотвратить окислительный стресс и воспаление, оба из которых являются часто предвестники сердечных заболеваний.

    6. Борется с бактериями с множественной лекарственной устойчивостью

    По мнению многих экспертов, каннабиноиды (включая CBD) обладают необычной способностью уничтожать бактерии (особенно штаммы, устойчивые к лекарствам). Хотя все еще необходимы дополнительные исследования, чтобы понять, как и почему это работает, согласно исследованию 2011 года, CBD может замедлить прогрессирование туберкулеза у крыс. Исследователи пришли к выводу, что CBD, вероятно, делает это путем подавления пролиферации Т-клеток, а не за счет наличия антибактериальных свойств.

    Каким бы ни был механизм уничтожения бактерий, CBD, безусловно, кажется мощным оружием против недавно появившихся устойчивых к антибиотикам «супербактерий».

    7. Лечите диабет 1 типа

    Мы уже обсуждали, как масло CBD помогает бороться с воспалением. То же самое верно и в случае, когда иммунная система атакует клетки поджелудочной железы, вызывая диабет 1 типа.

    Исследование, опубликованное в 2016 году рецензируемым международным научным журналом Clinical Hemorheology and Microcirculation, показало, что CBD может облегчить это воспаление в поджелудочной железе.

    Точно так же в документе, представленном в том же году в Лиссабоне, Португалия, было высказано предположение, что CBD может уменьшить воспаление и защитить или даже отсрочить развитие диабета 1 типа.

    8. Помощь в лечении шизофрении

    Шизофрения — серьезное и сложное психическое заболевание, которое обычно лечится с помощью терапии и фармацевтических препаратов (которые часто имеют серьезные побочные эффекты). Принимая во внимание, что многие люди нашли масло CBD полезным для уменьшения галлюцинаций за вычетом побочных эффектов.

    Согласно обзору исследований за март 2015 года, CBD является безопасным, эффективным и хорошо переносимым средством лечения психоза. Но необходимы дополнительные исследования, чтобы внедрить КБР в клиническую практику.

    Вы должны помнить, что ТГК, психоактивное соединение, содержащееся в марихуане, на самом деле может усиливать психоз среди пострадавших, в то время как КБД только помогает уменьшить его и может даже противодействовать психозу, вызванному злоупотреблением марихуаной.

    Еще одно исследование, опубликованное в Current Pharmaceutical Design, другом рецензируемом медицинском журнале, освещающем вопросы, связанные с фармакологией и медицинской химией, показало, что CBD имеет эффекты, аналогичные эффектам некоторых антипсихотических препаратов, и что это соединение намного безопаснее и эффективнее. действенный вариант для людей с шизофренией.

    9. Лечить кожные заболевания

    Несколько исследований показали, что масло CBD обладает высоким потенциалом для лечения кожных заболеваний, таких как экзема, путем стимулирования аномальной гибели клеток.

    Он также помогает регулировать выработку кожного сала, тем самым уменьшая угри. Исследование 2014 года, опубликованное в Journal of Clinical Investigation, биомедицинском журнале, опубликованном Американским обществом клинических исследований, показало, что CBD помогает снизить выработку кожного сала, отчасти из-за противовоспалительных свойств CBD.По этим причинам CBD вполне может стать в будущем средством лечения вульгарных угрей, наиболее распространенной формы прыщей.

    Интересно отметить, что каннабидиол также содержит определенные питательные вещества, такие как витамин Е, которые помогают питать и защищать кожу.

    10. Борьба с зависимостью

    Масло CBD может помочь людям с зависимостью преодолеть симптомы абстиненции, говорится в обзоре, опубликованном в журнале Substance Abuse в 2015 году. В своем отчете они проанализировали 14 ранее опубликованных исследований, в которых ученые определили, что CBD может иметь терапевтический эффект на людей с опиоидной, кокаиновой и / или психостимулирующей зависимостью.

    Они также обнаружили, что CBD может помочь в лечении людей с каннабисной и табачной зависимостью. Исследователи обнаружили доказательства того, что КБД блокирует, а иногда и снижает влияние ТГК на разум.

    Наше исследование, опубликованное в журнале Addictive Behaviors, показало, что курильщики, которые использовали ингаляторы, содержащие CBD, выкуривали меньше сигарет, чем обычно. У них также не было никаких симптомов отмены, таких как тяга к никотину.

    В аналогичном обзоре, опубликованном в Neurotherapeutics, отмечается, что CBD уменьшает симптомы, связанные со злоупотреблением психоактивными веществами, такие как беспокойство, симптомы, связанные с настроением, боль и бессонница.

    Необходимы дополнительные исследования, но эти результаты определенно указывают на возможность того, что КБР помогает предотвратить или уменьшить симптомы отмены.

    11. Борьба с определенными типами рака

    Людям, борющимся с раком, CBD может предоставить им естественную альтернативу облегчению боли и симптомов.

    Хотя необходимо провести дополнительные исследования роли CBD в лечении рака, любые имеющиеся в настоящее время данные выглядят многообещающими.

    По данным Американского онкологического общества, масло CBD может замедлять рост и распространение определенных типов рака (у животных), учитывая, что это психоактивное соединение эффективно борется с окислительным стрессом и воспалением.

    Согласно обзору, опубликованному в British Journal of Clinical Pharmacology, CBD может значительно помочь предотвратить распространение рака. Исследователи отметили, что это соединение подавляет рост раковых клеток и способствует их разрушению.

    12. Болезнь Альцгеймера

    CBD может предотвратить развитие дефицита социального признания среди пациентов, говорится в исследовании, опубликованном в Journal of Alzheimer’s Disease. Это означает, что CBD может помочь людям на ранних стадиях болезни Альцгеймера сохранить способность узнавать знакомые лица и, в свою очередь, замедлить прогрессирование болезни.

    Полезно ли масло CBD для всех? Кому это выгодно?

    Согласно недавнему отчету Всемирной организации здравоохранения, продукты CBD обычно безопасны для всех. Однако если вы беременны, это может негативно повлиять на ваше тело и здоровье вашего будущего ребенка. Кроме того, если вы в настоящее время принимаете какие-либо лекарства, вам необходимо проконсультироваться с врачом, прежде чем использовать масло CBD. Это необходимо для того, чтобы избежать отрицательных выпадений при смешивании двух компонентов.

    Масла CBD оказывают положительное влияние как на людей, так и на животных.

    У людей они могут помочь улучшить или вылечить широкий спектр проблем со здоровьем, от повседневных недугов до некоторых хронических состояний. Преимущества CBD для здоровья включают:

    • Акне
    • Беспокойство
    • Депрессия
    • Хроническая боль
    • Воспаление
    • Бессонница
    • Эпилепсия
    • Глаукома
    • Диабет 1 типа
    • Потеря аппетита и массы тела
    • Болезнь Паркинсона Болезнь Альцгеймера
    • Болезни сердца
    • Некоторые формы рака

    Также было обнаружено, что КБД помогает некоторым животным преодолевать аналогичные проблемы со здоровьем благодаря тому факту, что у всех млекопитающих есть эндоканнабиноидная система.

    В частности, для кошек и собак, которых мы, люди, предпочитаем держать в качестве домашних животных, масло CBD может помочь с:

    • Чрезмерным лаем или плачем
    • Домашние животные ладят с другими домашними животными
    • Облегчение боли
    • Расслабление домашних животных перед поездкой в ​​приют ветеринар или дальние поездки
    • Отсутствие аппетита
    • Боязнь разлуки

    С домашними животными трудно определить точную дозировку. Но для начала рекомендуется доза в 1 мг на 10 фунтов веса тела.При необходимости вы увеличиваете дозу до 5 мг для той же массы тела. В некоторых случаях может потребоваться более высокая доза. Однако перед увеличением дозировки лучше проконсультироваться с ветеринаром. Повторяйте дозу 3-4 раза в день для лучшего эффекта.

    Как работает масло CBD?

    Чтобы подействовать, каннабиноиды, такие как CBD, присоединяются к определенным рецепторам в эндоканнабиноидной системе (ECS) организма, которая представляет собой сложную биологическую систему, отвечающую за регулирование определенных конкретных аспектов функций организма, таких как память, сон и настроение, а также метаболические процессы. такие процессы, как энергетический баланс.

    Масла CBD, как полагают, также улучшают несколько других состояний здоровья. Согласно недавнему исследованию, все эти проблемы со здоровьем вызваны дерегулированием ECS.

    Интересно, что эндоканнабиноидная система, о которой большинство людей не слышали до недавнего времени, была обнаружена в результате различных исследований и исследований воздействия каннабиса на организм и поэтому была названа в честь самого растения.

    ECS, состоящий из эндоканнабиноидов и их рецепторов, распространяется по всему телу, от мозга и других органов до желез и иммунных клеток.Эта система вызывает различные реакции в разных частях тела. Однако все дело в гомеостазе или внутреннем балансе. Рецепторы в головном мозге контролируют координацию и движение, боль, эмоции и настроение, мышление, аппетит и воспоминания, среди других функций, в то время как рецепторы иммунной системы влияют на боль и воспаление.

    Воодушевляющее чувство эйфории после долгой пробежки или после полового акта вызывается эндоканнабиноидами, которые стимулируются этими естественными действиями, заставляя вас чувствовать себя «кайфом» — чувство приподнятости без боли или без боли.

    КБД и ТГК действуют как внешние стимуляторы, которые оказывают схожее действие на эту очень мощную систему организма, вызывая различные реакции на разные части тела.

    Сколько времени нужно, чтобы CBD вступил в силу?

    Большинство людей используют масло CBD, проглатывая его с помощью капельницы. Учитывая, что он используется сравнительно недавно, его точная дозировка еще не установлена. Следовательно, также трудно определить точные временные рамки, в которые он вступит в силу. Было замечено, что разные люди реагируют на КБР с разной скоростью и по-разному.

    Хотя в этой области необходимы более обширные исследования, до сих пор не было зарегистрировано ни одного случая передозировки CBD. Кроме того, существует очень мало побочных эффектов, что делает передозировку практически невозможной.

    Большинство компаний предоставят вам приблизительную дозировку на этикетке или в руководстве. Если вы принимаете его в качестве профилактической добавки или лекарства, придерживайтесь этих инструкций.

    Некоторые могут увидеть заметные изменения в течение нескольких секунд, а другие могут ничего не замечать в течение нескольких недель.Если вы принимаете его, например, от воспаления или боли и не видите улучшения в течение нескольких недель, вы можете увеличить дозировку, но, конечно, после консультации с врачом.

    Считается, что небольшая доза CBD 3-4 раза в день имеет больше терапевтических преимуществ, чем одна большая доза.

    Однако следует помнить, что масло CBD, хотя само по себе вполне безопасно, может вступать в реакцию с другими лекарствами, особенно со стероидами и опиоидами. Поэтому всегда консультируйтесь с врачом, прежде чем пробовать такие народные методы лечения.

    CBD Oil Побочные эффекты:

    Обзор: перевешивают ли преимущества CBD Oil побочные эффекты?

    Несмотря на свои проблемы безопасности, нельзя отрицать, как много людей все чаще выбирают продукты КБР более фармацевтических единиц для лечения различных заболеваний — как физического, так и психического.

    Have any Question or Comment?

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *